 | 紅榮微再（上海）生物工程技術(shù)有限公司 |
會(huì)員.png)
11
15021010459
當(dāng)前位置：首頁>>技術(shù)中心>>技術(shù)文章>>貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染優(yōu)選：ProteanFect轉(zhuǎn)染試劑盒
在線溝通：
顏先生 （銷售）
- 電話：
- 400-021-2200
- 手機(jī)：
- 15021010459
- 傳真：
- 聯(lián)系我時(shí)，
- 告知來自化工儀器網(wǎng)
- 個(gè)性化：
- www.hyrmb.com.cn
- 商鋪網(wǎng)址：
- http://apwanrong.com/st321032/
- 公司網(wǎng)站：
- www.hyrmb.com
貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染優(yōu)選：ProteanFect轉(zhuǎn)染試劑盒
閱讀：239發(fā)布時(shí)間：2025-2-13
01. 貼壁VS懸浮轉(zhuǎn)染區(qū)別
貼壁轉(zhuǎn)染與懸浮轉(zhuǎn)染在操作流程、時(shí)間成本、轉(zhuǎn)染效率、操作難度、細(xì)胞用量、觀察難度和適用場景上有所區(qū)別。貼壁轉(zhuǎn)染通常需要較長時(shí)間等待細(xì)胞貼壁，但操作簡單，轉(zhuǎn)染效率高，適合常規(guī)轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)和需要高效率轉(zhuǎn)染的場景。懸浮轉(zhuǎn)染則時(shí)間成本較短，細(xì)胞用量更靈活，適合快速篩選實(shí)驗(yàn)和大規(guī)模轉(zhuǎn)染。
02. 細(xì)胞培養(yǎng)與準(zhǔn)備
以LX2細(xì)胞為例，這是一種人類肝星狀細(xì)胞的永生化細(xì)胞系，廣泛用于肝臟研究。LX2細(xì)胞貼壁生長，呈上皮細(xì)胞樣。培養(yǎng)基成分為DMEM培養(yǎng)基，含10%胎牛血清和1%雙抗。轉(zhuǎn)染前，確保細(xì)胞處于良好生長狀態(tài)，活率需超過90%。調(diào)整細(xì)胞轉(zhuǎn)染密度時(shí)，避免反復(fù)離心，以免影響細(xì)胞活力和轉(zhuǎn)染效率。
03. 轉(zhuǎn)染操作
3.1 細(xì)胞準(zhǔn)備
- 提前一天種板，準(zhǔn)備貼壁細(xì)胞。
- 在96孔板中加入約2.5×10^4細(xì)胞，細(xì)胞過夜貼壁。
- 待細(xì)胞匯合度為70%-80%時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，用Opti-MEM輕柔清洗細(xì)胞兩次，并加入20 μL Opti-MEM備用。
3.2 配置ProteanFect轉(zhuǎn)染體系
- 在40 μL Reagent A中加入0.5 μg EGFP mRNA，充分混勻。
- 往上述混合物中加入1.4 μL Reagent B混勻。
3.3 轉(zhuǎn)染
- 將上述ProteanFect轉(zhuǎn)染液加入細(xì)胞。
- 37℃培養(yǎng)箱孵育60分鐘。
04. 轉(zhuǎn)染檢測
使用ProteanFect試劑盒轉(zhuǎn)染LX2細(xì)胞后，可以通過熒光顯微鏡觀察EGFP的表達(dá)，評(píng)估轉(zhuǎn)染效率和細(xì)胞形態(tài)。細(xì)胞活率可通過鏡下觀察、臺(tái)盼藍(lán)染色或流式細(xì)胞術(shù)等方法檢測。
紅榮微再（上海）生物工程技術(shù)有限公司主營產(chǎn)品：BD全血RNA采血管-分子診斷供應(yīng)商
化工儀器網(wǎng) 設(shè)計(jì)制作，未經(jīng)允許翻錄必究.Copyright(C) http://apwanrong.com, All rights reserved.
以上信息由企業(yè)自行提供，信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé)，化工儀器網(wǎng)對(duì)此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。 溫馨提示：為規(guī)避購買風(fēng)險(xiǎn)，建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。