產(chǎn)品描述

EZ Mark自發(fā)光蛋白Marker（WB）含有6個可自發(fā)光的純化蛋白質(zhì)，分子量從23 ~117 KD，均含有可被小鼠、兔子和山羊等各類抗體識別的基團。當進行化學發(fā)光（ECL）檢測時，6個蛋白質(zhì)由于結(jié)合了相應的抗體，也可以發(fā)光，從而達到自發(fā)光的效果。自發(fā)光Marker發(fā)出的光與目的蛋白質(zhì)條帶發(fā)的光一樣，可以通過X光膠片曝光或者ECL發(fā)光成像儀進行檢測。
EZ Mark自發(fā)光蛋白Marker（WB）具有可提供精確的分子量標準（6個蛋白質(zhì)中的5個都經(jīng)過質(zhì)譜的鑒定，為精確分子量，質(zhì)譜圖請咨詢），可用于監(jiān)控一抗、二抗和ECL過程，以及目的條帶大小ECL后可以直接比較等優(yōu)點。
訂購信息

運輸與保存
藍冰運輸。-20 ℃保存，有效期36個月。
使用方法

1. 自發(fā)光Marker室溫融化后可以在SDS-PAGE膠中直接上樣。自發(fā)光Marker的使用量，一般5 μL即可。如有必要，也可根據(jù)您使用膠的厚度、上樣孔的寬度、一抗和二抗的種類、滴度以及ECL液的靈敏度等相關因素進行適當?shù)恼{(diào)整，一般在2~10 μL之間。

2. 轉(zhuǎn)膜后，進行正常的封閉、一抗和二抗孵育，最后進行ECL發(fā)光檢測。

3. 蛋白發(fā)光液染色后，可以同時檢測到6個自發(fā)光條帶和目的條帶（如圖1B所示）。目的條帶的大小一目了然。

產(chǎn)品效果

圖1. 《雙色預染Marker 和自發(fā)光Marker套裝》實驗效果圖

1. 《雙色預染Marker》經(jīng)電泳并轉(zhuǎn)膜后的效果圖。

2. 《自發(fā)光Marker》經(jīng)ECL后的效果圖。

3. 《雙色預染Marker》和《自發(fā)光Marker》合并后的彩色效果圖。

《雙色預染Marker》和《自發(fā)光Marker》合并后的黑白效果圖。實驗條件：12% SDS-PAGE膠，一抗為小鼠Anti-Actin抗體，二抗為HRP標記的山羊抗小鼠抗體。泳道1：預染Marker； 泳道2：自發(fā)光Marker；泳道3：細胞裂解樣品。【注】：《自發(fā)光Marker》中的117.52 kDa條帶未經(jīng)質(zhì)譜鑒定，為理論分子量，別的5個條帶均已經(jīng)過質(zhì)譜鑒定，為實際分子量。
注意事項

1. 本產(chǎn)品僅限于科學實驗研究使用，不得用于臨床診斷、治療等領域。

2. 自發(fā)光Marker和預染Marker可以根據(jù)您的喜好選擇上樣方式，既可以分開來上樣，也可以在同一個泳道上兩種Marker。

3. 如果同一個泳道上兩種Marker時，最好先將兩種Marker在離心管中勻混后，再上樣，如此操作，Marker的條帶會更清晰。

4. 自發(fā)光Marker上樣量過大時可能會有微弱的雜帶，可以通過減少上樣量來解決。

5. 自發(fā)光Marker可以與本公司的預染Marker一起使用，更有利于全程監(jiān)控Western Blot所有環(huán)節(jié)。

6. WB常見問題分析及解決方案詳見李記生物微信公眾號《蛋白電泳那些事兒》系列。

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