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液相色譜流動相溶劑如何選擇
流動相在液相色譜中扮演的角色
目標(biāo)化合物在液相色譜中的保留取決于該物質(zhì)與流動相和固定相間的作用強度。流動相是整個液相色譜分離過程中的“血液"，它對組分有親和力，并參與固定相對組分的競爭，因此流動相的選擇直接影響組分的分離度。
流動相選擇原則
1
適用性
用作流動相的溶劑應(yīng)與固定相不相溶，并能保持色譜柱的穩(wěn)定性。
2
純度
流動相所用溶劑應(yīng)有高純度，以防流動相中的雜質(zhì)在色譜柱上積累，致使柱性能下降。
3
檢測背景值
譬如使用紫外檢測器時，所用流動相在檢測波長下應(yīng)沒有吸收或吸收很?。划?dāng)使用示差檢測器時，應(yīng)選擇折射率與樣品差別較大的溶劑作為流動相。
4
粘度與沸點
溶劑的粘度和沸點要適當(dāng)。
使用低粘度溶劑可以減少溶質(zhì)的傳質(zhì)阻力，有利于提高柱效，但如yi醚等溶劑也不宜使用，因為粘度過低的溶劑容易在色譜柱或檢測器內(nèi)形成氣泡，影響分離。而粘度高溶劑會影響溶質(zhì)的擴散、傳質(zhì)，降低柱效，還會使柱壓升高，分離時間延長。
對于制備和純化樣品所用的流動相最好選用沸點較低的溶劑，這樣易用蒸餾等方法把溶劑從柱后收集液中去除，有利于樣品的純化。
5
對樣品的溶解度
如果流動相對樣品的溶解度較差，樣品會在色譜柱柱頭沉積，導(dǎo)致柱效下降。
6
毒性
應(yīng)盡量避免使用具有顯著毒性的溶劑，減少環(huán)境污染和確保實驗人員的安全。
常用的流動相
反相色譜是大多數(shù)樣品分析的shou選分離模式，該模式一般比其他液相色譜模式的普適性更好、更方便、更容易獲得令人滿意的分離效果。在反相色譜中，一般使用非極性/弱極性鍵合固定相色譜柱，如C18柱、苯基柱等。
流動相的選擇通常以水相（包括加入一定量的酸、堿、無機鹽緩沖液等）做基礎(chǔ)溶劑，再加入一定量的能與水互溶的如甲醇（質(zhì)子給體）、乙腈（質(zhì)子受體）、四氫呋喃（偶極溶劑）等極性溶劑，其極性及其K值（分配系數(shù)）和分離選擇性有顯著影響。下表列出一些常用溶劑的極性參數(shù)p’。
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