疏水色譜(Hydrophobic Int
18種氨基酸分析方法(3)
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月旭科技(上海)股份有限公司
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色譜條件:
1. 色譜柱:月旭 Amino Acid,5μm,4.6×250mm
2. 梯度程序:
流動相 A: 0.1mol/L醋酸鈉溶液(pH 6.50):乙睛=93:7
流動相 B: 水:乙腈=20:80
2. 注意事項:
1)進樣分析:先進對照品溶液,后進供試品溶液;
2)緩沖溶液,隔天需重新配制;
3)防止緩沖鹽析出。
1. 操作步驟:
1)設(shè)置柱溫40℃和流速1.0mL/min;
2)將A、B兩個通道用乙腈:水=20:80排盡氣泡(如B通道的原存留液中不含緩沖鹽,則無需用乙腈:水=20:80排氣泡),B通道用流動相B再排盡氣泡;
3)用乙腈:水=20:80(A通道)沖洗系統(tǒng)20min,以防止緩沖鹽析出;
4)A通道用流動相A排盡氣泡,然后用流動相A走基線30min,平衡色譜柱;
5)運行一次空白梯度;
6)進樣分析;
7) 分析完成后:
I)用乙腈:水=20:80代替流動相A,進水樣(清洗自動進樣器),進行梯度洗脫;
II)換90%乙腈沖洗色譜柱40min以上。
流 速:1.0mL/min
柱 溫:40℃
波 長:254nm
進樣量:10μL