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    工業(yè)激光共焦顯微鏡脫離了傳統(tǒng)光學(xué)顯微鏡的場光源和局部平面成像模式，采用激光束作光源，激光束經(jīng)照明針孔，經(jīng)由分光鏡反射至物鏡，并聚焦于樣品上，對標(biāo)本焦平面上每一點(diǎn)進(jìn)行掃描。 組織樣品中如果有可被激發(fā)的熒光物質(zhì)，受到激發(fā)后發(fā)出的熒光經(jīng)原來入射光路直接反向回到分光鏡，通過探測針孔時先聚焦，聚焦后的光被光電倍增管（PMT）探測收集，并將信號輸送到計算機(jī)，處理后在計算機(jī)顯示器上顯示圖像。 在這個光路中，只有在焦平面的光才能穿過探測針孔，焦平面以外區(qū)域射來的光線在探測小孔平面是離焦的，不能通過小孔。因此，非觀察點(diǎn)的背景呈黑色，反差增加，成像清晰。由于照明針孔與探測針孔相對于物鏡焦平面是共軛的，焦平面上的點(diǎn)同時聚焦于照明針孔與探測針孔，焦平面以外的點(diǎn)不會在探測針孔處成像，即共聚焦。以激光作光源并對樣品進(jìn)行掃描，在此過程中兩次聚焦，故稱為激光掃描共聚焦顯微鏡。

    工業(yè)激光共焦顯微鏡從產(chǎn)生至今獲得了巨大的發(fā)展，掃描方式從zui初的狹縫掃描方式（掃描速度較快，圖像分辨率不高），到階梯式掃描技術(shù)（提高了圖像分辨率，標(biāo)本制備要求太高），再到驅(qū)動式光束掃描器（掃描速度較快，符合共聚焦原理）。另外，目前激光掃描共聚焦顯微鏡的光源設(shè)計和分光采集技術(shù)也有較大的改進(jìn)，主要集中在如下幾個方面：

    （1） 現(xiàn)代的工業(yè)激光共焦顯微鏡可以根據(jù)研究需要選擇不同的激光器。選擇激光光源時，一方面要滿足研究工作對波長的需求，另一個方面要考慮到激光光源的壽命。

    （2）一代激光掃描共聚焦顯微鏡可以用棱鏡狹縫分光的新技術(shù)，配上合適的激光源后，能夠擺脫傳統(tǒng)的波長濾片組的限制，連續(xù)和自由地選擇*波長。

    （3）用于工業(yè)激光共焦顯微鏡的物鏡也做了較大的改進(jìn)，不但具有平場復(fù)消色差特性，而且能與高速掃描功能相匹配。