化學(xué)發(fā)光標(biāo)記免疫分析法
化學(xué)發(fā)光標(biāo)記免疫分析又稱化學(xué)發(fā)光免疫分析(CL IA ) ,是用化學(xué)發(fā)光劑直接標(biāo)記抗原或抗體的免疫分析方法。常用于標(biāo)記的化學(xué)發(fā)光物質(zhì)有吖啶酯類化合物——acridin ium ester (A E) ,是有效的發(fā)光標(biāo)記物 , 其通過起動(dòng)發(fā)光試劑(N aOH2H2O 2 ) 作用而發(fā)光, 強(qiáng)烈的直接發(fā)光在一秒鐘內(nèi)完成,為快速的閃爍發(fā)光。吖啶酯作為標(biāo)記物用于免疫分析, 其化學(xué)反應(yīng)簡(jiǎn)單、快速、無(wú)須催化劑; 檢測(cè)小分子抗原采用競(jìng)爭(zhēng)法 ,大分子抗原則采用夾心法 , 非特異性結(jié)合少, 本底低; 與大分子的結(jié)合不會(huì)減小所產(chǎn)生的光量, 從而增加靈敏度。
發(fā)光酶免疫分析法
從標(biāo)記免疫分析角度, 化學(xué)發(fā)光酶免疫分析( chem ilum inescen t enzym e imm unoassay,CL E IA ) , 應(yīng)屬酶免疫分析, 只是酶反應(yīng)的底物是發(fā)光劑,操作步驟與酶免分析*相同: 以酶標(biāo)記生物活性物質(zhì)(如酶標(biāo)記的抗原或抗體) 進(jìn)行免疫反應(yīng), 免疫反應(yīng)復(fù)合物上的酶再作用于發(fā)光底物,在信號(hào)試劑作用下發(fā)光, 用發(fā)光信號(hào)測(cè)定儀進(jìn)行發(fā)光測(cè)定。目前常用的標(biāo)記酶為辣根過氧化物酶(HRP) 和堿性磷酸酶(AL P) ,它們有各自的發(fā)光底物。
增強(qiáng)發(fā)光酶
增強(qiáng)發(fā)光酶免疫分析(enhanced luminescence enzyme immunoassay, ELEIA )在發(fā)光系統(tǒng)中加入增強(qiáng)發(fā)光劑, 如對(duì)2碘苯酚等, 以增強(qiáng)發(fā)光信號(hào),并在較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)保持穩(wěn)定, 便于重復(fù)測(cè)量, 從而提高分析靈敏度和準(zhǔn)確性。在全自動(dòng)分析儀上, 還可通過計(jì)算機(jī)嚴(yán)密控制, 進(jìn)行自動(dòng)操作, 如加試劑,混合, 溫育, 洗滌, 加發(fā)光試劑, 發(fā)光計(jì)數(shù), 數(shù)據(jù)處理, 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線, 直至完成病人血清樣品的分析并打印出結(jié)果。
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