全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀是電磁波,波長(zhǎng)100nm——400nm稱為紫外光,400nm——780nm之間的光可被人眼觀察到,大于780nm稱為紅外光。綠色植物之所以是綠色,是因?yàn)橹参镂盏拇蟛糠譃榧t橙光和藍(lán)紫光,但對(duì)綠色不吸收,反射出來(lái),呈現(xiàn)為綠色。全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀測(cè)定的原理是在特定波長(zhǎng)下,檢測(cè)被測(cè)物的吸光值。微孔板是一種經(jīng)事先包理于放置待測(cè)樣本的透明塑料板,板上有多排大小均勻一致的小孔,孔內(nèi)都包埋著相應(yīng)的抗原或抗體,微孔板上每個(gè)小孔可盛放零點(diǎn)幾毫升的溶液。在使用全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀的時(shí)候,我們應(yīng)該注意這些方面:
一、外觀
全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀上應(yīng)有儀器名稱,型號(hào),編號(hào),生產(chǎn)廠家,出廠日期和電源電壓;各調(diào)節(jié)旋鈕,按鍵和開(kāi)關(guān)均能正常工作,外表面無(wú)明顯機(jī)械損傷;顯示文字應(yīng)清楚完整。
二、全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀的穩(wěn)定性漂移、
選用492nm波長(zhǎng),在吸光度o.0A處,測(cè)量標(biāo)稱值為1.0A的光譜中性濾光片測(cè)量操作按儀器說(shuō)明進(jìn)行、,記錄儀器示值或均值,10min后再次記錄儀器示值或均值,前后兩次測(cè)量值之差不應(yīng)超過(guò)±0.00。
三、吸光度測(cè)量的準(zhǔn)確度
選用405,492和620nm波長(zhǎng),以空氣為參比,分別測(cè)量標(biāo)稱值為0.5和1.0A的光譜中性玻璃濾光片,用測(cè)試板代替酶標(biāo)板,按儀器說(shuō)明連續(xù)測(cè)量3次,按下式計(jì)算準(zhǔn)確度:AA=1/3A、+A。+A3、—A:A:為標(biāo)準(zhǔn)值、。
四、吸光度測(cè)量的重復(fù)性
波長(zhǎng)選用同3、,在酶標(biāo)板排加注空白溶液,第二排加入濃度為200rig/ml的重鉻酸鉀溶液,重復(fù)測(cè)量5次。記錄每次測(cè)量的第二排吸光度值,取第二排任一孔吸光度值與各次對(duì)應(yīng)孔吸光度值。
?。ㄎ澹┤ㄩL(zhǎng)酶標(biāo)儀的線性
選用540nm波長(zhǎng),將標(biāo)稱值o.5,1.0A中性濾光片分別放入測(cè)試板樣本位置中,以空氣為參比,各重復(fù)測(cè)量3次;然后將以上兩片中性濾光片疊加后置于測(cè)試板的同一孔位中,重復(fù)測(cè)量3次。
六、測(cè)量速度的檢定
選用492nm波長(zhǎng),放人96孔酶標(biāo)板進(jìn)行測(cè)量,用秒表計(jì)測(cè)儀器打印出全部數(shù)據(jù)的時(shí)間。
全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀除了在選購(gòu)時(shí),應(yīng)盡可能自檢外,在用于中也應(yīng)定期檢定,以保證全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀測(cè)量的有效性。
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