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含有緩沖成分的移動(dòng)相基本上可以通過(guò)兩種途徑來(lái)配制：

在與有機(jī)相組分混合前完成包括pH調(diào)節(jié)步驟在內(nèi)的所有緩沖溶液配置過(guò)程。

在緩沖溶液和有機(jī)相組分混合之后調(diào)節(jié)總?cè)芤簆H值。

在水溶液體系中pH是一個(gè)很好確定的參數(shù)，但是在含有部分有機(jī)相的溶劑中pH值就沒(méi)那么好確定了，或者說(shuō)質(zhì)子濃度就不容易測(cè)準(zhǔn)了。

 

      因此建議在配制緩沖水溶液時(shí)，就調(diào)好pH值，用規(guī)格為0.4微米的濾膜過(guò)濾后再同有機(jī)相組分混合。需要注意以下幾點(diǎn)：

pKa值兩側(cè)+/-1范圍內(nèi)是zui有效的緩沖區(qū)域，以此為參考選擇正確的緩沖系統(tǒng)。

如果需要將高濃度緩沖液同有機(jī)相組分混合，請(qǐng)考慮緩沖溶質(zhì)沉淀析出的可能性。

在使用前總是選用規(guī)格為4微米的濾膜對(duì)緩沖液進(jìn)行過(guò)濾。

注意純水相緩沖液中細(xì)菌和真菌滋生的可能性。

在加入有機(jī)相組分時(shí)，整體溶液pH值通常會(huì)產(chǎn)生一些漂移，無(wú)機(jī)緩沖體系（例如磷酸鹽）的pH值會(huì)有所上升，而有機(jī)緩沖體系（例如乙酸）pH值則會(huì)有所下降。