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            上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
            中級會(huì)員 | 第10年

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            ATCC細(xì)胞
            蛋白質(zhì)產(chǎn)品
            核酸擴(kuò)增產(chǎn)品
            elisa試劑盒
            生化試劑
            PCR試劑盒
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            分子生物學(xué)試劑
            ELISA實(shí)驗(yàn)檢測
            蛋白
            抗體

            細(xì)胞培養(yǎng)基常用幾種重要的添加成份及使用過程中應(yīng)注意的問題

            時(shí)間:2017/5/4閱讀:2575
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            酚紅在ATCC細(xì)胞培養(yǎng)基中用作pH值的指示劑,一般情況下,可以通過酚紅的指示作用判斷培養(yǎng)基的pH值,中性時(shí)為紅色,酸性時(shí)為黃色,堿性時(shí)為紫色;但低血清或是無血清細(xì)胞培養(yǎng)基中酚紅的含量與普通細(xì)胞培養(yǎng)基中的酚紅含量不同,不能通過肉眼觀察或通過經(jīng)驗(yàn)來判定pH值,建議使用pH計(jì)進(jìn)行測定。酚紅通常對含血清的細(xì)胞培養(yǎng)基的生物制品質(zhì)量并不會(huì)產(chǎn)生明顯影響,也可通過純化技術(shù)去除,但酚紅在無血清細(xì)胞培養(yǎng)基中可能帶來胞內(nèi)鈉/鉀失衡,影響細(xì)胞生長,這種作用能被血清所中和或減輕。因此,酚紅并不是細(xì)胞培養(yǎng)基中必需的一種成份,很多國外的疫苗或抗體企業(yè)在過程中都使用無酚紅細(xì)胞培養(yǎng)基。
            碳酸氫鈉在ATCC細(xì)胞培養(yǎng)基中主要是作為緩沖系統(tǒng),此外還具有調(diào)節(jié)滲透壓的作用。通常產(chǎn)品使用說明中的碳酸氫鈉推薦量是一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)、安全量,是在科學(xué)的基礎(chǔ)上根據(jù)實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)所得,但是由于不同的細(xì)胞系(株)不同,同一株細(xì)胞適應(yīng)環(huán)境也可能不同(細(xì)胞耐受性不同等),且存在的地域性水質(zhì)差異等,在實(shí)際過程中也可稍作改動(dòng),但使用者需做相應(yīng)的檢測(理化及細(xì)胞試驗(yàn)等)。
            HEPES是一種非離子緩沖液,在pH 7.2 ~7.4范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力,其在高濃度時(shí)對一些細(xì)胞可能有毒。HEPES緩沖液可與低水平的碳酸鈉(0.34 g /L)共用,以抵消因額外加入HEPES引起的滲透壓增加。其安全濃度范圍是10~25 mmol/L。
            丙酮酸鈉可以作為細(xì)胞培養(yǎng)中的替代碳源,盡管細(xì)胞更傾向于以葡萄糖作為碳源,但是,如果沒有葡萄糖的話,細(xì)胞也可以代謝丙酮酸鈉。
            谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,4℃下放置1周可分解50%,使用中單獨(dú)配制,置-20℃冰箱中保存,使用前加入ATCC細(xì)胞培養(yǎng)液中。

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