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            上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
            中級(jí)會(huì)員 | 第10年

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            ATCC細(xì)胞
            蛋白質(zhì)產(chǎn)品
            核酸擴(kuò)增產(chǎn)品
            elisa試劑盒
            生化試劑
            PCR試劑盒
            標(biāo)準(zhǔn)品
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            ELISA實(shí)驗(yàn)檢測(cè)
            蛋白
            抗體

            腫瘤細(xì)胞清洗與滅菌

            時(shí)間:2017/8/24閱讀:437
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            一、腫瘤細(xì)胞實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

            能獨(dú)立地進(jìn)行用于細(xì)胞培養(yǎng)的各種器皿的清洗與消毒,掌握干熱滅菌法、濕熱滅菌法和濾過(guò)除菌法的操作,了解化學(xué)消毒法的使用方法。

            二、實(shí)驗(yàn)原理

            清洗與消毒是組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的*步,是組織培養(yǎng)中工作量zui大,也是zui基本的步驟。體外培養(yǎng)細(xì)胞所使用的各種玻璃或塑料器皿對(duì)清潔和無(wú)菌的要求程度很高。細(xì)胞養(yǎng)不好與清洗不*有很大關(guān)系。清洗后的玻璃器皿,不僅要求干凈透明,無(wú)油跡,而且不能殘留任何物質(zhì)。如有毒的化學(xué)物質(zhì),哪怕殘留0.1個(gè),也可能影響細(xì)胞生長(zhǎng)。滅菌手段的選擇十分重要,對(duì)不同的物品需采用不同的滅菌方法。假如選用的方法不對(duì),即使達(dá)到了無(wú)菌卻使被滅菌藥品喪失了營(yíng)養(yǎng)價(jià)值、生物學(xué)特性或其他使用價(jià)值也不行。以下在每種滅菌步驟中都介紹其使用范圍。

            三、實(shí)驗(yàn)材料、用品

            1、材料:無(wú)臭氧型紫外燈,微孔濾膜(直徑25):孔徑為0.22μm,微孔濾膜(直徑90):孔徑為0.22 μm,過(guò)濾器(直徑25)。

            2、藥品:70%或75%酒精,0.1%新潔爾滅,煤酚皂溶液(來(lái)蘇兒水),0.5%過(guò)氧乙酸,乳酸,37%甲醛,高錳酸鉀,NaOH,鹽酸,重鉻酸鉀,濃硫酸(工業(yè)),DEPC水[體積分?jǐn)?shù)0.1%的焦炭酸二乙酯(diethylpyroearbonate)]。

            3、儀器:超凈臺(tái),干燥箱,高壓鍋,過(guò)濾器,過(guò)濾泵。

            四、實(shí)驗(yàn)步驟

            (一)實(shí)驗(yàn)器具清洗

            l 玻璃類 1、主要有:培養(yǎng)瓶,血清瓶,小青瓶,移液管,離心管,試管,培養(yǎng)皿等。

            2、清洗步驟:

            泡在含有洗潔凈的自來(lái)水中→撈出來(lái)用毛刷將實(shí)驗(yàn)器具各個(gè)面刷洗至少25遍→自來(lái)水沖洗25遍→過(guò)一遍一蒸水→泡入鉻酸,過(guò)夜(24h左右)→從鉻酸中撈出器具,自來(lái)水沖洗25遍→過(guò)三遍一蒸水,三遍三蒸水→烘箱內(nèi)烘干→收入柜子備用→用前高溫滅菌(121℃,25min)→烘干→使用。

            注意:新的玻璃器具先要泡鹽酸1天,然后清洗步驟與上面相同。

            l 塑料類

            1 塑料類器具主要包括:孔板,大槍頭,瓶蓋,濾器,采血管等。

            2 清洗步驟:

            (1)孔板,采血管

            泡在有洗潔凈的自來(lái)水中→用超聲清洗儀超聲3遍(每遍1小時(shí),200C)→在含有洗潔凈的自來(lái)水中用毛刷或者紗布將各個(gè)面刷洗至少25遍→過(guò)一遍一蒸水→泡入鹽酸過(guò)一個(gè)禮拜→從鹽酸中撈出后自來(lái)水沖洗25遍→過(guò)三遍一蒸水(每遍3次),三遍三蒸水→烘箱內(nèi)烘干→收入柜子→用前包裝好照鈷→使用

            (2)大槍頭,蓋子,濾器

            腫瘤細(xì)胞在含有洗潔凈的自來(lái)水中用毛刷或者紗布將各個(gè)面刷洗至少25遍→用超聲清洗儀超聲1遍(每遍45分鐘,200C)→自來(lái)水沖洗→過(guò)三遍一蒸水(每遍3次),三遍三蒸水→烘箱內(nèi)烘干→收入柜子→用前包裝好滅菌→使用

            注意:(1)烘孔板時(shí)溫度不應(yīng)太高,烘干后用報(bào)紙包裹,裝入箱子內(nèi),照鈷,便可使用。

            (2) 新的培養(yǎng)瓶蓋子泡舊5%稀鹽酸1天→再用2%NaOH煮20min →自來(lái)水沖洗→洗潔精清洗→用超聲清洗儀超聲1遍(每遍45分鐘,200C)→沖洗15遍→過(guò)三遍一蒸(每遍3次)→過(guò)三遍三蒸水→烘干使用
            1,2,4,5-環(huán)己烷四甲酸二酐(>98.0%(T))    英文名稱:    1,2,4,5-Cyclohexanetetracarboxylic Dianhydride    質(zhì)量規(guī)格:    >98.0%(T)            CAS號(hào):    2754-41-8    
            1,2,4,5-四甲基苯(NMR定量標(biāo)準(zhǔn)品,99.8%(GC))    英文名稱:    1,2,4,5-Tetramethylbenzene    質(zhì)量規(guī)格:    NMR定量標(biāo)準(zhǔn)品,99.8%(GC)            CAS號(hào):    95-93-2    
            1,2,4,5-四氯苯(標(biāo)準(zhǔn)品)    英文名稱:    1,2,4,5-Tetrachlorobenzene    質(zhì)量規(guī)格:    分析標(biāo)準(zhǔn)品            CAS號(hào):    95-94-3    
            1,2,4,5-四氯苯標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.104mg/ml,基體:異辛烷)    英文名稱:    1,2,4,5-Tetrachlorobenzene solution    質(zhì)量規(guī)格:    0.104mg/ml,基體:異辛烷            CAS號(hào):    95-94-3    
            腫瘤細(xì)胞

             

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