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微生物的污染干細(xì)胞方式
(1)空氣:空氣微生物傳播的zui主要途徑。如果培養(yǎng)操作場(chǎng)地與外界隔離不嚴(yán)或消毒不充分,外界不潔空氣很容易侵入造成污染?,F(xiàn)實(shí)驗(yàn)室普遍使用凈化工作臺(tái),能產(chǎn)生過(guò)濾無(wú)菌的屏障氣流,可有效防止不潔空氣的進(jìn)入。但凈化工作臺(tái)使用過(guò)久,濾器受塵埃阻塞,可使凈化工作不能正常進(jìn)行。工作時(shí)不帶口罩或面對(duì)操作野大聲講話、咳嗦等使外界氣流過(guò)強(qiáng),污染空氣可進(jìn)入操作野,造成污染。因此工作時(shí)減少空氣流動(dòng)是防止污染的重要環(huán)節(jié)。培養(yǎng)設(shè)施不能設(shè)在通風(fēng)場(chǎng)所,一般培養(yǎng)是環(huán)境中每立方米含菌不應(yīng)該超過(guò)1-5個(gè)。
(2)器材:各種培養(yǎng)皿器及器械清洗消毒不*。污物殘留及培養(yǎng)用液等滅菌不*都可以引入有害物質(zhì)。另外需要注意的是CO2溫箱。由于溫箱內(nèi)濕度大,溫度適宜,存取干細(xì)胞不慎將培養(yǎng)液漏出,易使細(xì)菌霉菌孳生,而CO2開(kāi)方式培養(yǎng),如不定期消毒可形成污染。
(3)操作:實(shí)驗(yàn)操作無(wú)菌觀念不強(qiáng)、動(dòng)作不準(zhǔn)確,使用污染的器具,或封瓶不嚴(yán)多可發(fā)生污染,培養(yǎng)兩種以上細(xì)胞時(shí),操作不規(guī)范。交叉使用吸管或培養(yǎng)液瓶等有可能導(dǎo)致細(xì)胞的交叉感染。
(4)血清:有些血清在時(shí)就已被支原體或病毒等污染,即可成為污染的來(lái)源。
(5)組織樣本:原代培養(yǎng)的污染多數(shù)來(lái)源于組織樣本;另一方面手術(shù)時(shí)使用碘酒消毒,這些混入組織中的碘酒也可以影響干細(xì)胞生長(zhǎng)。
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