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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>公司動(dòng)態(tài)>>ATCC細(xì)胞原蟲污染原因
培養(yǎng)液可輕微渾濁,在顯微鏡下細(xì)小的點(diǎn)狀物數(shù)量非常多,輕微活動(dòng),ATCC細(xì)胞雖然可以生長(zhǎng)但繁殖速度卻明顯減慢,而且細(xì)胞狀態(tài)不好,邊緣不清楚,細(xì)胞不透亮。他們與細(xì)胞可共生但會(huì)與細(xì)胞爭(zhēng)奪營(yíng)養(yǎng)。這種共生是非常普遍的,但他們的數(shù)量小,細(xì)胞占優(yōu)勢(shì)所以不會(huì)影響到細(xì)胞的正常生長(zhǎng),只有當(dāng)他們到達(dá)一定的數(shù)量時(shí)就會(huì)影響到細(xì)胞的生長(zhǎng),zui終形成惡性循環(huán)。
ATCC細(xì)胞污染的可能原因:配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等。
關(guān)于培養(yǎng)基的無菌狀況,取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細(xì)胞),37 度試培養(yǎng)一段時(shí)間后觀察。如果沒有細(xì)菌生長(zhǎng) 就是操作的問題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(硫酸鏈霉素和氨芐青霉素)。但雙抗有時(shí)會(huì)影響細(xì)胞的狀態(tài),所以在做轉(zhuǎn)染、檢測(cè)細(xì)胞某項(xiàng)指標(biāo)前一定要撤去雙抗,以避免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
ATCC細(xì)胞實(shí)驗(yàn)前,超凈臺(tái)/實(shí)驗(yàn)間紫外照射30min,細(xì)胞培養(yǎng)室有24h的空氣消毒裝置更好了。操作前70%酒精擦超凈臺(tái)消毒,酒精擦手,擦培養(yǎng)瓶,擦培養(yǎng)基瓶以及各種瓶子的口,總之,所有進(jìn)超凈臺(tái)的物品都用酒精擦拭一遍。拿培養(yǎng)瓶和培養(yǎng)液時(shí)候盡量托下面拿,切忌不要拿瓶頸部位。有一點(diǎn)要注意的是,超凈臺(tái)里面的東西一定要盡量少放,東西太多活影響超凈臺(tái)內(nèi)空氣流通及空氣除菌。實(shí)驗(yàn)過程中盡量避免打鬧說笑。
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