干細(xì)胞通常對(duì)PH和溫度變化較為敏感。讓細(xì)胞在每個(gè)階段都至少有一個(gè)適應(yīng)過(guò)渡期。
細(xì)胞存活率和細(xì)胞密度
細(xì)胞在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期中期快速分裂，且在適應(yīng)過(guò)程開(kāi)始時(shí)，存活率大于90%。這一點(diǎn)至關(guān)重要。當(dāng)細(xì)胞需傳代時(shí)，建議采用1:2或1:3的小傳代比例，以維持更高的細(xì)胞密度，同時(shí)提供隔絕期間可能有助于細(xì)胞的細(xì)胞生長(zhǎng)因子。當(dāng)細(xì)胞適應(yīng)新的培養(yǎng)條件時(shí)，在增大細(xì)胞傳代密度。
細(xì)胞生長(zhǎng)
如果在適應(yīng)過(guò)程中，細(xì)胞停止了生長(zhǎng)，則需讓細(xì)胞有更多的時(shí)間來(lái)適應(yīng)培養(yǎng)基組合。例如，在方法1的階段4，向無(wú)血清培養(yǎng)基添加少量的血清(1-3%)。這樣有助于細(xì)胞更容易地適應(yīng)新的培養(yǎng)基。然后，在幾個(gè)過(guò)渡期內(nèi)，緩慢地減少血清量，直至學(xué)清量為0。
懸浮培養(yǎng)物
Meiatech公司的無(wú)血清培養(yǎng)基和無(wú)蛋白培養(yǎng)基不含血清中所發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞附著延伸影子。在一段過(guò)渡期內(nèi)，貼壁細(xì)胞將開(kāi)始離開(kāi)表面，并成為懸浮細(xì)胞系開(kāi)始生長(zhǎng)。細(xì)胞也可能因適應(yīng)而發(fā)生形態(tài)變化。監(jiān)測(cè)細(xì)胞的生長(zhǎng)速度，只要細(xì)胞能夠與新系統(tǒng)相融合，任何形態(tài)變化都不重要。
細(xì)胞叢
在適應(yīng)于無(wú)血清培養(yǎng)期間，細(xì)胞容易形成叢。傳代培養(yǎng)時(shí)，將叢輕輕折斷，使其分散開(kāi)。將培養(yǎng)物從靜止細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)轉(zhuǎn)移到可旋轉(zhuǎn)錐形瓶?jī)?nèi)，這樣可能會(huì)有助于防止細(xì)胞叢的形成。
抗生素
由于血清蛋白易于粘合到抗生素上，因此，不建議在無(wú)血清適應(yīng)過(guò)程中使用抗生素。如不存在血清蛋白，則抗生素水平可能會(huì)對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生毒性。
預(yù)防措施
確保在開(kāi)始適應(yīng)過(guò)程前，儲(chǔ)存有大量原培養(yǎng)基的細(xì)胞。如果干細(xì)胞沒(méi)有存活到下一階段，則在整個(gè)過(guò)程中保存每一階段使用的培養(yǎng)瓶。
乙酰哈巴苷    20mg    供含量測(cè)定    111925-201001
醋酸甲羥孕酮    100mg    含量測(cè)定    100001-200504
安乃近    500mg    含量測(cè)定    100002-200605
（+）2-氨基丁醇    100mg    含量測(cè)定    100003-200703
苯丙酸諾龍    100mg    含量測(cè)定    100004-200603
苯丁酸氮芥    50mg    含量測(cè)定    100005－199402
苯甲酸雌二醇    100mg    含量測(cè)定    100006-200504
芐氟噻嗪    100mg    含量測(cè)定    100007-200703
干細(xì)胞