腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞；AAV-293圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞；AAV-293圖片
形態(tài)特性  上皮細(xì)胞
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  我們推薦使用AAV-293細(xì)胞株繁殖腺病毒相關(guān)重組病毒。 AAV-293源自普遍使用的 HEK293細(xì)胞株，但產(chǎn)生的病毒滴度更高。 HEK293細(xì)胞是剪切過(guò)的腺病毒5型DNA轉(zhuǎn)染的人胚腎細(xì)胞。 跟HEK293細(xì)胞一樣，AAV-293細(xì)胞反式表達(dá)腺病毒E1基因，當(dāng)共轉(zhuǎn)染三個(gè)AAV助質(zhì)粒(一個(gè)含ITR的質(zhì)粒，pAAV-RC, 和E1缺失助質(zhì)粒)時(shí)，可以產(chǎn)生有感染力的腺病毒-相關(guān)病毒顆粒。 
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%
傳代方法  消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。
傳代情況 P(10+5)
凍存條件  *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測(cè) 陰性
STR  Amelogenin:X；CSF1PO:7,11,12；D13S317:12；D16S539:9,13；D18S51:17,18；D19S433:15,18；D21S11:28,30.2；D2S1338:19；D3S1358:15,17；D5S818:8,9；D7S820:11；D8S1179:12,14；FGA:23；TH01:7,9.3；TPOX:11；vWA:16,19
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

糖原Ⅲ型    500mg
陶瓷研缽 ( 直徑 60 mm)    1個(gè)
陶瓷研缽 ( 直徑 75 mm)    1個(gè)
天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶    500 U
天凈沙 DNA 甲基化修飾試劑盒    150 次
天凈沙 Ribo-SPIA cDNA 擴(kuò)增試劑盒    20 次
天凈沙 SPIA 擴(kuò)增試劑盒 ( 用于擴(kuò)增 DNA 模板 )    20 次
天凈沙單細(xì)胞 RNA 擴(kuò)增試劑盒    80 次
天凈沙非同位素探針雜交試劑盒    5次
天凈沙非同位素探針雜交試劑盒    5次
天凈沙核酸濃縮劑    30mL
天凈沙甲基化 PCR 2.0 試劑盒    150 次
天凈沙鎳柱原位再生試劑盒    20 次
天凈沙通用型MLPA 試劑盒    20 次
天凈沙細(xì)胞蛋白質(zhì) -RNA 雙提取試劑盒     50 次
天狼猩紅    5g
天門冬酰胺酶    250UAFC[7-氨基-4-三氟甲基香豆素] 熒光參照標(biāo)準(zhǔn)AFC [7-Amino-4-trifluoromethylcoumarin] Fluorescence reference standard
6-TAMRA， SE [6-羧基四甲基羅丹明，琥珀酰亞胺酯] 可標(biāo)記寡核苷酸6-TAMRA， SE [6-Carboxytetramethylrhodamine， succinimidyl ester] Validated for labeling oligos
TQ3 馬來(lái)酰亞胺Tide Quencher 3 maleimide [TQ3 maleimide]
5/6-TAMRA標(biāo)記的Asp天冬氨酸FMOC-Asp（5/6-TAMRA）-OH
二肽酰多肽酶IV （DPPIV）熒光底物Gly-Pro-AMCGly-Pro-AMC
Pluronic F-127 20%溶液于DMSO中Pluronic F-127 20% solution in DMSO
pH熒光探針BCBCF酸BCBCF acid
5（6）-FAM氨基磷酸酯5（6）-FAM Phosphoramidite
FMOC-4，5-dehydro-L-Leu-OHFMOC-4，5-dehydro-L-Leu-OH
鬼筆環(huán)肽-iFluor 594偶聯(lián)物Phalloidin-iFluor 594 Conjugate
Cyanine 3酰肼 [相當(dāng)于Cy3酰肼]Cyanine 3 hydrazide [equivalent to Cy3 hydrazide]
FITC-C6-D（OMe）E（OMe）VD（OMe）-FMKFITC-C6-D（OMe）E（OMe）VD（OMe）-FMK
Cal-520 馬來(lái)酰亞胺Cal-520 maleimide
2C-T-2 （hydrochloride） （50 mg）4-（ethylthio）-2，5-dimethoxy-benzeneethanamine， monohydrochloride； 2，5-Dimethoxy-4-ethylthiophenethylamine； 2C-T-2 （hydrochloride）
Prostaglandin D1 （10 mg）9。alpha。，15S-dihydroxy-11-oxo-prost-13E-en-1-oic acid； PGD1； Prostaglandin D1
Canertinib （hydrochloride） （25 mg）N-[4-[（3-chloro-4-fluorophenyl）amino]-7-[3-（4-morpholinyl）propoxy]-6-quinazolinyl]-2-propenamide， dihydrochloride； CI 1033|PD 183805； Canertinib （hydrochloride）
2-methyl Benzamideoxime （1 g）（Z）-N’-hydroxy-2-methylbenzimidamide； 2-methyl Benzamideoxime
2-（4-Pyridyl）-4-methyl-thiazole-5-Carboxylic Acid （100 mg）4-methyl-2-（4-pyridinyl）-5-thiazolecarboxylic acid； 2-（4-Pyridyl）-4-methyl-thiazole-5-Carboxylic Acid
天然蛋白 A    1mg
甜菜堿    10g
甜菜堿溶液，5M，PCR     1.5mL
甜菜堿鹽酸鹽    100g
填入法 DNA 末端標(biāo)記試劑盒 A    5次