人乳腺癌細(xì)胞；MCF7圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 人乳腺癌細(xì)胞；MCF7圖片
形態(tài)特性  上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  該細(xì)胞是從一名69歲的白人女性乳腺癌患者的胸腔積液中分離建立的。該細(xì)胞保留了多個(gè)分化乳腺上皮的特性，包括：能通過(guò)胞質(zhì)雌激素受體加工雌二醇并能形成隆突結(jié)構(gòu)（domes）；該細(xì)胞表達(dá)WNT7B癌基因；TNF-α可以抑制MCF-7細(xì)胞的生長(zhǎng)；抗雌激素處理能調(diào)節(jié)細(xì)胞胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白（IGFBP）的分泌。 
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
傳代方法  1:3~1:6傳代；每周2~3次。
傳代情況 C5
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）
STR  Amelogenin：X；CSF1PO：10；D13S317：11；D16S539：11，12；D18S51：14；D19S433：13，14；D21S11：30；D2S1338：21，23；D3S1358：16；D5S818：11，12；D7S820：8，9；D8S1179：10，14；FGA：23，24，25；TH01：6；TPOX：9，12；vWA：14，15；
同工酶 
染色體  72~84
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

NCI-H838(人非小細(xì)胞肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
NRK-52E，大鼠腎細(xì)胞gersion
CW-2(人結(jié)腸細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
mCF, 小鼠心臟成纖維細(xì)胞
KLE(人子宮內(nèi)膜細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
HELF(人胚肺成纖維細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
中性紅染色液(活細(xì)胞染色用)規(guī)格：100ml
CHO(倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠角膜上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
6-10B, 人鼻咽細(xì)胞系
人子宮頸表細(xì)胞英文名稱：MS751
BPL瓊脂/BPL Agar食品中沙門氏菌選擇性分離培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
TMB Kit/TMB底物顯色試劑盒（可溶型）100ml100ml
胰蛋白酶(含10mL 酶解緩沖液)1mL
麥芽汁肉湯/麥芽浸膏湯/Malt Extract Broth酸性罐食品無(wú)菌試驗(yàn)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
人胰腺星狀細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
EC肉湯/大腸桿菌檢驗(yàn)肉湯/E.Coli Broth糞大腸菌群、大腸桿菌的檢驗(yàn)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
人臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞
V-P半固體瓊脂發(fā)酵管BR20支國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
人肺大靜脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL1-EBIO （50 mg）1-ethyl-1，3-dihydro-2H-benzimidazol-2-one； 1-Ethylbenzimidazolinone； 1-EBIO
AGI-5198 （5 mg）N-[2-（cyclohexylamino）-1-（2-methylphenyl）-2-oxoethyl]-N-（3-fluorophenyl）-2-methyl-1H-imidazole-1-acetamide； AGI-5198
D-Luciferin （potassium salt） （100 mg）4，5-dihydro-2-（6-hydroxy-2-benzothiazolyl）-4S-thiazolecarboxylic acid， monopotassium salt； D-Luciferin （potassium salt）
Costunolide （1 mg）3aS，4，5，8，9，11aR-hexahydro-6E，10E-dimethyl-3-methylene-cyclodeca[b]furan-2（3H）-one； Costus lactone|Melampolide|NSC 106404； Costunolide
DPPH （50 mg）2，2-diphenyl-1-（2，4，6-trinitrophenyl）-hydrazinyl； 2，2-Diphenyl-1-Picrylhydrazyl|DPPH radical； DPPH
α-Truxillic Acid （10 mg）（1α，2α，3β，4β）-2，4-diphenyl-1，3-cyclobutanedicarboxylic acid； Gratissimic acid； α-Truxillic Acid
L-（+）-Ergothioneine （50 mg）αS-carboxy-2，3-dihydro-N，N，N-trimethyl-2-thioxo-inner salt-1H-imidazole-4-ethanaminium； 2-Mercaotohistidine betaine|NSC 7175； L-（+）-Ergothioneine
Ryanodine （1 mg）（3S，4R，4aR，6S，6aS，7S，8R，8aS，8bR，9S，9aS）-dodecahydro-4，6，7，8a，8b，9a-hexahydroxy-3，6a，9-trimethyl-7-（1-methylethyl）-6，9-methanobenzo[1，2]pentale，6-bc]furan-8-yl ester-1H-pyrrole-2-carboxylic acid； Ryanodine
PF-04981517 （10 mg）1-methyl-3-[1-methyl-5-（4-methylphenyl）-1H-pyrazol-4-yl]-4-[（3S）-3-（1-piperidinyl）-1-pyrrolidinyl]-1H-pyrazolo[3，4-d]pyrimidine； CYP3cide； PF-04981517