人結直腸癌細胞；T84圖片【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人結直腸癌細胞；T84圖片
形態(tài)特性  上皮樣；多角
生長特性 貼壁生長
特征特性  T84細胞來源于一位72歲的男性結直腸癌患者的肺部轉(zhuǎn)移灶；皮下接種至BALB/c裸鼠并連續(xù)傳代23次后建立該細胞系。在裸鼠身上傳代的過程中，該腫瘤仍保持原始的結直腸癌的組織學特性。T84細胞系生長至匯合狀態(tài)時形成單層細胞，相鄰細胞間有緊密連接和細胞橋粒；該細胞有多種肽類激素和神經(jīng)遞質(zhì)的受體，維持電解質(zhì)的定向運輸；角蛋白陽性。 
培養(yǎng)條件  DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium)  10%FBS
傳代方法  1:2~1:4傳代；每周2次。
傳代情況 C5
凍存條件  基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法（-）
STR  Amelogenin：X；CSF1PO：10；D13S317：9；D16S539：10，11；D18S51：17；D19S433：13；D21S11：31；D2S1338：23，26；D3S1358：19；D5S818：12；D7S820：8，10；D8S1179：15；FGA：24；TH01：6，9；TPOX：8，11；vWA：17，18；
同工酶 
染色體  51~60
使用權限 A類
細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

葡萄糖肉浸液肉湯/Dextrose Meat Infusion Broth用于溶血性鏈球菌的增菌培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口
成纖維細胞英文名稱：3T3
亞碲酸鹽肉湯基礎/亞碲酸鈉肉湯培養(yǎng)基基礎/lurite Broth Base金黃色葡萄球菌的增菌培養(yǎng)，每100ml培養(yǎng)基需另加入1%亞碲酸鈉1ml250克國產(chǎn)/進口
SK-MEL-1, 人膚黑色素瘤細胞
NCI-H520(人肺鱗細胞)5×106cells/瓶×2
Normal Goat Serum For Blocking/封閉用山羊血清工作液(免疫組化封閉液)10ml國產(chǎn)gersion
CAL-27(人舌鱗細胞)5×106cells/瓶×2
Mammalian Protein Extraction Reagent/哺動物蛋白抽提試劑25次、100次國產(chǎn)
Jurkat, Clone E6-1 (人急性T淋巴細胞白血病細胞)5×106cells/瓶×2
Hela(人宮頸細胞)5×106cells/瓶×2
中華鱉心肌來源細胞英文名稱：CSSTH1
CEM/C1(人急性淋巴細胞白血病細胞)5×106cells/瓶×2
小鼠畸胎瘤細胞英文名稱：Pcc4Isopropyl chloroformate酸異丙酯108-23-6
Daminozide丁酰肼1596-84-5
Bis(2-methylpropyl) oxalate草酸二異丁酯2050-61-5
2-Mercapto-5-methyl-1,3,4-thiadiazole2-巰基-5-基-1,3,4-噻二唑29490-19-5
Z-D-GLU(OBZL)-OHZ-D-GLU(OBZL)-OH59486-73-6
m-Tolyl isocyanate異酸間酯621-29-4
TRIMETHOXY(7-OCTEN-1-YL)SILANE7-基三氧基硅烷52217-57-9
NA硬脂酸鑭
Columbianadin二氫歐山芹醇當歸酸酯5058-13-9
Thiobencarb禾草丹28249-77-6
Octaphenylsilsesquioxane八基-POSS5256-79-1
FMOC-GLN(TRT)-WANG RESINFMOC-GLN(TRT)-WANG RESIN
(S)-(-)-2,2'-Diami,1'-binaphthalene(S)-(-)-1,1'-聯(lián)-2-萘胺18531-95-8
10-Deacetylbaccatin III10-去乙?；涂ㄍ?2981-86-5
TERT-BUTYL PROPIOLATE叔丁基酸酯13831-03-3
1-Methoxynaphthalene1-萘2216-69-5
3,4,5,6-Tetrahydrophthalic anhydride3,4,5,6-四氫酐2426-02-0
2-Bromo-4-methoxy-5-(benzyloxy)benzaldehyde2-溴-4-氧基-5-芐氧基6451-86-1
Dihydromyricetin二氫楊梅素27200-12-0
Isopentyl formate酸異酯110-45-2
4T1(小鼠腺細胞)5×106cells/瓶×2
人轉(zhuǎn)移胰腺腺細胞英文名稱：AsPC-1
雙洗瓊脂平板10塊國產(chǎn)/進口
HAVSMC, 人主動脈平滑肌細胞
人高分化胃細胞英文名稱：NCI-N87