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當前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>ATCC細胞>>腫瘤細胞>> 人宮頸癌細胞;H1HeLa圖片
參 考 價 | 面議 |
產(chǎn)品型號
品 牌ATCC
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時間:2017-01-07 08:51:37瀏覽次數(shù):359次
聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)人宮頸癌細胞;H1HeLa圖片【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人宮頸癌細胞;H1HeLa圖片
形態(tài)特性 上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞由V. Hamparian從HeLa細胞建立,對鼻病毒敏感,用于鼻病毒的傳代及滴定。
培養(yǎng)條件 L15: Leibovitz Medium 10%FBS
傳代方法 1:4~1:10傳代,每周換液2~3次
傳代情況 P19
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:9,10;D13S317:12,13.3;D16S539:9,10;D18S51:16;D19S433:13,14;D21S11:27,28;D2S1338:17;D3S1358:15,18;D5S818:11,12;D7S820:8,12;D8S1179:12,13;FGA:18,21;TH01:7;TPOX:8,12;vWA:16,18;
同工酶
染色體
使用權限 A類
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質(zhì)量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
硝酸纖維素膜,13×20cm1張
固相內(nèi)毒素清除劑100g
聚乙二醇 20000250g
柱式酵母 DNAout50 次
CAS20325-40-0鄰聯(lián)茴香胺1g
12-252Stb12 菌種1mL
一步法96 孔板單菌落質(zhì)粒DNAout( 真空法)1次
肌苷5g
硫柳汞25g
考馬斯亮藍 R-25010g
CAS31282-04-9潮霉素 B1g
120703-10鹽酸萬古霉素溶液 ,50mg/mL10mL
熒光法死細胞檢測試劑盒1000 次
聚乙烯吡咯烷酮 K360100g
青霉素 G 鹽1g
DAB 法生物素雜交試劑盒5次
CAS26305-03-3胃蛋白酶抑制劑5mg
131074-50SDS-PAGE 樣品制備試劑盒50 次
周細胞生長因子5mL
L-Glutathione (reduced form)( 抗氧化劑 )1g
丙酮酸激酶2mg
雙染細胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V- 熒光素 647·7-AAD)50 次
CAS504-17-6β- 硫代巴比妥酸5g
100810-1000超快蛋白銀染試劑盒1000mL
α-Actin 小鼠單抗30μL
氯霉素溶液 ,25mg/mL10mL(1S,2S,6S,9R)-9-hydroxy-9-(hydroxymethyl)-2-[(2S,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-3-oxabicyclo[4.3.0]nona-4,7-diene-5-carboxylic acid水晶蘭苷5945-50-6
Fluorescamine熒光胺38183-12-9
NA二硫化碳中系物混合標樣
Tetrabutylphosphonium bromide四丁基溴化磷3115-68-2
1-ISOPROPYL-4-NITROBENZENE對基異丙基1817-47-6
Mogroside V羅漢果糖苷 V88901-36-4
Lilolidine5,6-二氫-4H-吡咯并[3,2,1-IJ]喹啉5840/1/7
Bis(2,4-pentanediono)nickel乙酰丙鎳3264-82-2
2-Bromo-5-methylthiophene2-溴-5-基噻吩765-58-2
Chlorpheniramine maleate馬來酸那敏113-92-8
(1E,6E)-1-(4-hydroxy-3-methoxy-phenyl)-7-(4-hydroxyphenyl)hepta-1,6-di ene-3,5-dione去氧基姜黃素33171-16-3
TRIS(4-CHLOROPHENYL)PHOSPHINE三(4-基)膦1159-54-2
KAOLIN高嶺土1332-58-7
1-Bromo-4-tert-butylbenzene4-叔丁基溴3972-65-4
Lithium hexafluorophosphate六磷酸鋰21324-40-3
Ethyl gallate沒食子酸乙酯831-61-8
2-Hydroxypyrimidine hydrochloride2-羥基嘧啶酸38353-09-2
Indium chloride化銦10025-82-8
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