TSC22敲除的人乳腺癌細(xì)胞；231-Cas9-TSC22KO-553價(jià)格質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。

TSC22敲除的人乳腺癌細(xì)胞；231-Cas9-TSC22KO-553價(jià)格操作步驟：

1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性  上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  該細(xì)胞是利用Crispr/Cas9技術(shù)敲除了MDA-MB-231的部分TSC22基因，Western Blotting檢測(cè)發(fā)現(xiàn)該克隆無(wú)TSC22蛋白表達(dá)。 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS；400ug/ml G418
傳代方法  1:2~1:4傳代；每周2~3次。
傳代情況 C3
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）
STR  Amelogenin：x,x；CSF1PO：12,13；D12S391：17,18；D13S317：13,13；D16S539：12,12；D18S51：11,16；D19S433：11,14；D21S11：30,33.2；D2S1338：20,21；D3S1358：16,16；D5S818：12,12；D6S1043：18,18；D7S820：8,9；D8S1179：13,13；FGA：22,23；Penta E：11,11；TH01：7,9.3；TPOX：8,9,13；vWA：15,18；
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

Stb12 菌種1mL
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (100-600 bp)50 次
凝固血液 DNAout100 次
Origami(DE3)plysS 菌種1mL
120401-100熱啟動(dòng) Taq DNA 聚合酶100U
120668L-115mL DNA 離心超濾管 (30-50 KD)1個(gè)
蘇木素染色液15mL
大提柱式血液 RNAout5次
酵母電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞制備試劑盒20 次
Tuner(DE3)plysS 感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10
120413-600核糖核酸酶 H600U
131167-10DNA 溶解液10mL
糖蛋白染色試劑盒10 次
E-64 蛋白酶抑制劑，20mg/mL10mL
即用型高保真 PCR 試劑盒9mL
RNase 抑制劑 ( 小鼠源 )3000U
31RNAi，RNA 干擾載體及基因片段等2 μg
140450-24單細(xì)胞全轉(zhuǎn)錄組擴(kuò)增試劑盒 24 次
無(wú)內(nèi)毒素螢火蟲熒光素25mg
GSH—ST 測(cè)試盒100 T
3-BROMOPHENETHYL ALCOHOL3-溴乙醇28229-69-8
1,4-Dihydroxyanthraquinone1,4-二羥基蒽醌81-64-1
POLY(DIMETHYLSILOXANE) ETHERIMIDE氨丙基封端聚二基硅氧烷99904-16-2
2-Chloro-6-methoxypyridine2--6-氧基吡啶17228-64-7
BOC-ORN-OH叔丁氧羰基-L-鳥氨酸21887-64-9
Tetrabutylammonium fluoride trihydrate四丁基化銨,三水87749-50-6
Xanthan gum黃原膠11138-66-2
2-Amino-5-methoxybenzoic acid2-氨基-5-氧基酸6705/3/9
1-METHYLCYCLOPROPANE-1-CARBOXYLIC ACID1-基環(huán)丙烷-1-羧酸6914-76-7
Z-TYR(BZL)-OHO-基-N-叔丁基羰基-L-酪氨酸16677-29-5
Aluminium phosphate磷酸鋁7784-30-7
PARGYLINE HYDROCHLORIDE優(yōu)降306-07-0
3-[N-Tris(hydroxymethyl)methylamino]-2-hydroxypropanesulfonic acid sodium salt3-[N-三(羥基)氨基]-2-羥基丙磺酸105140-25-8
plantamajoside大車前苷104777-68-6
NorvalineL-正纈氨酸6600-40-4
NA醇中多環(huán)芳烴混合標(biāo)樣
tert-Butyldimethylsilyl chloride叔丁基二基硅烷18162-48-6
Nitenpyram啶蟲胺150824-47-8
Sclareol香紫蘇醇515-03-7
(S)-(+)-2-Amino-3-methyl-1-butanolL-纈氨醇2026-48-4
親和素1mg
LAMP 擴(kuò)增陽(yáng)性對(duì)照50 次