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            上海谷研實業(yè)有限公司
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            Cas9穩(wěn)定表達的人胰腺癌細胞;PANC-1-Cas9-554說明書

            參  考  價面議
            具體成交價以合同協(xié)議為準

            產(chǎn)品型號

            品       牌ATCC

            廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

            所  在  地上海市

            更新時間:2017-01-07 10:38:42瀏覽次數(shù):370次

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            Cas9穩(wěn)定表達的人胰腺癌細胞;PANC-1-Cas9-554說明書采用干冰保存運輸。收到細胞時,若干冰已經(jīng)*融化,請立即將細胞復蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請立即將細胞放入液氮中保存待用,請按條件貯存細胞,切不可將細胞置于高溫環(huán)境。

            Cas9穩(wěn)定表達的人胰腺癌細胞;PANC-1-Cas9-554說明書現(xiàn)貨直銷,免費快遞送貨上門。公司供應各種細胞株,細胞系,種類齊全,現(xiàn)貨,質(zhì)量保證,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學診斷。使用前仔細閱讀本說明書。

            產(chǎn)品名稱Cas9穩(wěn)定表達的人胰腺癌細胞;PANC-1-Cas9-554說明書
            用途僅用科研
            保存條件4℃保存一年;-20℃長期保存

            細胞名稱
            形態(tài)特性  上皮樣;多角形
            生長特性 貼壁生長
            特征特性  該細胞是采用慢病毒感染的方式使PANC-1細胞穩(wěn)定表達Cas9-Flag-Neo,經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆,經(jīng)Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白,可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。 
            培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS;400ug/ml G418
            傳代方法  1:2~1:4傳代;每周2~3次。
            傳代情況 C3
            凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
            支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
            STR  Amelogenin:x,x;CSF1PO:10,12;D12S391:22,22;D13S317:11,11;D16S539:11,11;D18S51:12,12;D19S433:11,16;D21S11:28,28;D2S1338:23,24;D3S1358:17,17;D5S818:11,13;D6S1043:11,12;D7S820:8,10;D8S1179:14,15;FGA:21,21;;Penta E:7,14;TH01:7,8;TPOX:8,11;vWA:15,15;
            同工酶 
            染色體 
            使用權(quán)限 A類
            運輸保存:
            采用干冰保存運輸。收到細胞時,若干冰已經(jīng)*融化,請立即將細胞復蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請立即將細胞放入液氮中保存待用,請按條件貯存細胞,切不可將細胞置于高溫環(huán)境。
            保存條件:4℃保存一年;-20℃長期保存
            用途:只可用于科研。
            儲存:液氮。
            運輸:干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
            細胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養(yǎng)實驗室通常在周一,周三,周五更換培養(yǎng)基。
            注意:*次植入后,在6-16小時內(nèi)更換培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細胞。到達客戶手中,出現(xiàn)任何問題(人為或者非人為),導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。對于細胞的真實性,支持客戶檢測對應的biomarker,(如證明細胞錯誤,全額退款。)公司針對每株細胞,鑒定gene background,鑒定完成的細胞可以提供數(shù)據(jù),用于證明細胞的真實性,并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧毎匦浴?br />操作步驟:
            1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
            2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
            3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
            4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
            5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
            6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
            7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
            8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
            9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
            10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
            11. 鏡檢觀察。CAS103-47-92-( 環(huán)己胺基 ) 乙烷磺酸5g
            140384-10GV3101 農(nóng)桿菌感受態(tài)細胞10×100μL
            新生霉素溶液 ,50mg/mL5mL
            核酸內(nèi)切酶 VIII1000U
            N- 苯甲酰 -L- 酪氨酸乙酯1g
            β- 乙醇,蛋白10mL
            CAS9001-40-5葡萄糖 -6- 磷酸脫氫酶1000U
            100820-250干粉型 LB-Lennox 培養(yǎng)基250g
            一站式蛋白質(zhì)非變性 PAGE 套裝 ( 高 pH)30 次
            剪切式勻漿機1臺
            氯化乙酰膽堿1g
            AMPPD100mg
            CAS224967-52-6次甲基綠1g
            120534-20兔抗 GST 標簽多抗20μL
            支氣道上皮細胞生長因子5mL
            快流速 DEAE- 瓊脂糖凝膠25mL
            硫酸銨100g
            GV3101 農(nóng)桿菌感受態(tài)細胞10×100μL
            CAS13292-46-1利福平250mg
            131053-5DTT,蛋白5g
            柱式微生物基因組 DNAout 50 次2-Naphthalenethiol2-萘硫酚91-60-1
            3,4-Dibromothiophene3,4-二溴噻吩3141-26-2
            Hydroxypropyl cellulose羥丙基纖維素9004-64-2
            Artemether蒿71963-77-4
            EUGENOL ACETATE乙酸丁香酚酯93-28-7
            Glucose-13C葡萄糖-13C
            2-Chlorobutane代仲丁烷78-86-4
            2,5-dioxo-1,4-cyclohexanedicarboxylic acid dimethyl ester2,5-二氧?;?1,4-環(huán)己二6289-46-9
            Benzyl 2-bromoacetate2-溴乙酸芐酯5437-45-6
            OXINE-COPPER8-羥基喹啉銅13014-03-4
            Polymyxin B sulfate硫酸多粘菌素B1405-20-5
            Molybdenum trioxide三氧化鉬1313-27-5
            3-Methylbenzyl cyanide間基乙2947-60-6
            Hydroxypropyl methyl cellulose羥丙基基纖維素9004-65-3
            DL-HistidineDL-組氨酸4998-57-6
            POLYISOBUTYLENE聚異丁9003-27-4
            4,4'-Dimethyldiphenylsulfoxide4,4'-二亞砜1774-35-2
            Tangeretin桔皮素481-53-8
            Aprotinin抑肽酶9087-70-1
            2,2,2-Trichloroacetamide2,2,2-三乙酰胺594-65-0

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