人肝癌細(xì)胞；HHCC圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 人肝癌細(xì)胞；HHCC圖片
形態(tài)特性  上皮細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性   
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法（-）
STR  Amelogenin:X；CSF1PO:9,10；D13S317:?；D16S539:9,10；D18S51:16,17；D21S11:27,28；D3S1358:15,18；D5S818:11,12；D7S820:8,12；D8S1179:12,13；FGA:18,21；PentaD:8,15；PentaE:7,14；TH01:7；TPOX:8,12；vWA:16,18
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 B類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

200 μL RNase-free 黃吸頭 ( 袋裝 )1000 支
N-2- 羥乙基 -N’-2- 乙基磺酸25g
親和層析柱30 mL
120901-200人內(nèi)皮細(xì)胞分離液 1.060200mL
甜菜堿溶液，5M，PCR 1.5mL
1,4- 雙丙烯酰1g
ECL 法地高雜交檢測試劑盒5次
90801B-20一站式 TA 克隆試劑盒 ( 含感受態(tài) )20 次
130921-50兩管式 RT-PCR 試劑盒 (AMV-Taq)50 次
玉米蛋白25g
96 孔板血液 DNAout( 真空法 )1次
AH109 酵母菌種1mL
12-227C41(DE3) 菌種1mL
硫酸葡聚糖1g
dNTP 溶液，2.5mM0.5mL
BAY11-7082(NF-κB 抑制劑 )2mg
AP 標(biāo)記的抗地高抗體10μLRN-h, 大鼠海馬趾神經(jīng)元
HCT116/人結(jié)腸細(xì)胞株國產(chǎn)
Andrade氏糖類肉湯/安德雷德氏糖類肉湯/Andrade,s Carbohydrate Broth細(xì)菌的糖發(fā)酵試驗(yàn)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
氯化三苯四氮唑沙保羅培養(yǎng)基/紅四氮唑沙保羅培養(yǎng)基/三苯基氯化四氮唑沙保羅培養(yǎng)基/TTC-Sabourand,s Medium用于分離真菌，酵母菌等250克國產(chǎn)/進(jìn)口
IM-9(人外周血B淋巴細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
中分子量單一蛋白Marker（90 kD）50次國產(chǎn)
人腺上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
大鼠氣管和支氣管上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
NCI-H460(人肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
Cell Counting Kit-8 (CCK-8試劑盒)規(guī)格：500次
PEA瓊脂/PEA Agar從含革蘭氏陰性菌的標(biāo)本中分離培養(yǎng)革蘭氏陽性菌250克國產(chǎn)/進(jìn)口
沙門氏菌顯色培養(yǎng)基/Salmonella Chromogenic Medium用于沙門氏菌的顯色培養(yǎng)1升國產(chǎn)/進(jìn)口
U-937(人組織細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠角膜成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
膽酸（牛）/牛膽酸/無水膽酸/膽汁酸/3，7，12-三羥甾代異戊酸/3α,7α,12α-三羥基-5β-膽烷酸/(3α,5β,7α,12α)-3,7,12-三羥基膽(甾)烷-24-酸單鈉鹽/Cholic acidBR，98%25/100/500克國產(chǎn)/進(jìn)口
大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
選擇性巧克力平板/Selectivity chocolate Plate10塊國產(chǎn)/進(jìn)口
81215B-20一站式 Western 印跡套裝 (AP 顯色法 )20 次
Rosetta(DE3) 菌種1mL
冰袋1個(gè)
CAS389-08-2萘啶酮酸5g
100883-100RNase-free 異硫氰酸胍溶液 ,5M100mL
一氧化氮檢測試劑盒 ( 硝酸還原酶法 )25 T