人急性早幼粒細(xì)胞白血病細(xì)胞；HL-60圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 人急性早幼粒細(xì)胞白血病細(xì)胞；HL-60圖片
形態(tài)特性  髓樣
生長特性 懸浮
特征特性  該細(xì)胞含有myc+致癌基因，受體表達(dá)：補(bǔ)體Fc；致瘤性：陽性。 
培養(yǎng)條件  IMDM: Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium  20%FBS
傳代方法  每2-3天換液一次，細(xì)胞接種密度為1E+05/ml,不要超過1E+06/ml。
傳代情況 完成目錄中顯示細(xì)胞污染廢棄
凍存條件 
支原體檢測 
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

RNA  Tris Base( 三羥甲基氨基甲烷 )100g
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (3)pBR322/BstN I50 次
AMV 逆轉(zhuǎn)錄酶200U
微量 RNA 定量試劑盒1mL
120905-200人淋巴細(xì)胞分離液 1.077(FICOLL 配置 ) 200mL
填入法 DNA 末端標(biāo)記試劑盒 C5次
L- 苯丙氨酸10g
SDS-PAGE 分離膠配膠液500mL
3120-0.1微量 RNA 助沉劑0.1mL
130933-50FTA 血片 DNAout50 次
預(yù)混型丙烯酰胺 - 甲叉雙丙烯干粉 (29:1)100g
ABTS 溶液，7mM 50mL
KM71 酵母菌種1mL
12-212DH10Bac 菌種1mL
硫酸鐵100g
dNTP 溶液，100mM 0.5mL
真菌種屬鑒定 PCR Mix 1100 次
超氧化物歧化酶，人10ku人血清白蛋白 V500mg
硝酸纖維素膜，13×20cm1張
70908-100DNA PAGE 膠回收試劑盒100 次
核糖核酸酶 HII250U
1000 μL RNase-free 藍(lán)吸頭 ( 盒裝已滅菌 )100 支
自誘導(dǎo)培養(yǎng)基 (lac 啟動(dòng)子 )200mL
CAS9003-39-8聚乙烯吡咯烷酮 K360100g
12-254Stb14 菌種1mL
M13 噬菌體單鏈基因組 DNAout50 次
一管式拭子 DNAout20 次
28重組蛋白（病毒）--
脂質(zhì)氧化 (MDA) 檢測試劑盒100 次
Hoechst33258 干粉10mg
疊氮25g
刀豆球蛋白 A Ⅲ50mg
CAS57-33-0戊巴比妥5g
17- μL RNase-free 藍(lán)吸頭 ( 盒裝已滅菌 )100 支
大提柱式藻類 RNAout5次
DTT，蛋白5g
131032-100人基因組 DNA，女性100μg
23-0110-100Camptothecin( 喜樹堿 )100μL
120630-25Fluorescein-12-dUTP 溶液，1mM25μL
JM107 菌種1mL
131236-250牛血清白蛋白封堵液250mL
Rosetta-gami B(DE3) 菌種1mL
非凍型拭子病毒保存液100mL
CAS1523-11-1#NAME?5g
60702-100RNase-free SDS 溶液 ,10%100mL
石蠟包埋組織 RNAout30 次
瓊脂糖100g