人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞；SK-N-MC圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞；SK-N-MC圖片
形態(tài)特性  上皮細(xì)胞
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  這株細(xì)胞與HTB-11都是神經(jīng)源的。1971年9月分離得到SK-N-MC后，發(fā)現(xiàn)它有中性多巴胺-β-羥化酶活性，也有細(xì)胞內(nèi)兒茶酚胺，用甲醛可以誘導(dǎo)出熒光。 
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  胎牛血清，10%
傳代方法  消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。
傳代情況 PN5
凍存條件  *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測(cè) 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

101219-50即用型熒光定量 RT-PCR 試劑盒50 次
131198-1一步法 96 孔板質(zhì)粒 DNAout( 真空法 )1次
FTA 血片 DNAout50 次
細(xì)胞計(jì)數(shù)液 (Vi-CELL 儀 )100 次
22-0070-0.2Actin-Tracker Green( 微絲綠色熒光探針 )0.2mL
四氮唑藍(lán) (NBT)250mg
酸性品紅5g
Carboxy-PTIO( 一氧化氮清除劑 )50mg
BamHI2000U
120307-5000SP6 RNA 聚合酶5000U
鹽酸四環(huán)素溶液 ,50mg/mL10mL
蒽酮25g
環(huán)孢霉素 A 溶液 ,10mg/mL1mL
130696-25G(5′)ppp(5′)A 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD
一站式 GST 標(biāo)記蛋白質(zhì)微量純化套裝20 次
WB600 枯草宿主菌菌種1mL人腺高轉(zhuǎn)移細(xì)胞英文名稱：MDA-MB-435
大鼠腦動(dòng)脈血管內(nèi)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
NCI-H2227(人小細(xì)胞肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
Caki-1, 人腎透明細(xì)胞膚轉(zhuǎn)移細(xì)胞
SIM動(dòng)力培養(yǎng)基/SIM培養(yǎng)基/Motility Test Medium(Semisolid)李氏菌動(dòng)力觀察，H抗原位相變異試驗(yàn)；硫化氫、動(dòng)力、吲哚試驗(yàn)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
雙歧桿菌BS培養(yǎng)基/BS Medium用于雙歧桿菌的分離培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
hFOB 1.19(SV40轉(zhuǎn)染人成骨細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
胰凝蛋白酶(含10mL酶解緩沖液)1mL
人腺細(xì)胞英文名稱：MDA-MB-468
大鼠腦動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
NCI-H226(人肺鱗細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
Caki-2(人腎透明細(xì)胞細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
SD-39瓊脂/SD-39 Agar濾膜法大腸桿菌O157的分離培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
人呼吸道上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
綠膿菌素測(cè)定用培養(yǎng)基/PDP瓊脂/King Medium A綠膿菌色素測(cè)定250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
Western Blot封閉液Ⅰ(BSA,pH7.5)/Blocking Buffer(BSA)500ml100ml、500ml
NCI-H358(人非小細(xì)胞肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
D- 半乳糖醛酸1g
Red-Pfu DNA 聚合酶100U
130413-5肝素瓊脂糖5mL