人肝癌細(xì)胞；Hep 3B2.1-7圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 人肝癌細(xì)胞；Hep 3B2.1-7圖片
形態(tài)特性  上皮細(xì)胞
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  該細(xì)胞系來(lái)自8歲男性黑人的組織。 其染色體模式數(shù)目為60，在裸鼠中能致瘤。 已知該細(xì)胞系含有與人類疾病有關(guān)的因子，需在2級(jí)生物安全防護(hù)下操作。  
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%
傳代方法  消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。
傳代情況 P(154+5)
凍存條件  *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測(cè) 陰性
STR  Amelogenin:X；CSF1PO:8；D13S317:12,14；D16S539:10；D18S51:20；D19S433:12.2,14；D21S11:30,31；D2S1338:21,25；D3S1358:15；D5S818:13；D7S820:8,10；D8S1179:12；FGA:18；TH01:6,7；TPOX:9；vWA:17
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

101215-100DNA  PVP K30( 聚乙烯基吡咯烷酮 K30)100g
鈣蛋白酶抑制劑Ⅰ溶液，10mg/mL10mL
T1 感受態(tài)細(xì)胞10×100μL
CAS65637-73-2QAE 葡聚糖凝膠 A-25100g
CAS6892-68-8二硫赤蘚醇1g
131233-20克必隆零背景 T 載體20 次
L-Citrulline(NO 中間體 )1g
SP600125(JNK 抑制劑 )5mg
130676-200Dicer(RNase III)200U
一站式動(dòng)物 mRNAout25 次
動(dòng)物線粒體純化試劑盒 ( 精提 )15 次
DAPI 干粉10mg
親和硅烷 25mL
CAS10034-93-2硫酸肼25g
51102-100細(xì)菌 RNAout100 次大鼠腸上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
MGC803全細(xì)胞裂解液100ug100uggersion
Bacterial Protein Extration Kit/細(xì)菌蛋白抽提試劑盒25次、100次國(guó)產(chǎn)
苯丙氨酸脫羧酶培養(yǎng)基/苯丙氨酸瓊脂培養(yǎng)基/Phenylalanine Deaminase Medium用于細(xì)菌苯丙氨酸脫羧酶試驗(yàn)100克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
小麥胚芽粉/Wheat gern powderBR500克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
NIH/3T3(小鼠胚胎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠成骨細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
人膽管細(xì)胞型肝細(xì)胞英文名稱：HCCC-9810
硝酸鹽蛋白胨水培養(yǎng)基/硝酸鹽胨水培養(yǎng)基/Nitrate Peptone Medium綠膿桿菌硝酸鹽還原產(chǎn)氣試驗(yàn)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
Primary Antibody Diluent/一抗稀釋液(綠色)20ml國(guó)產(chǎn)gersion
SCaBER(人膀胱鱗細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
甘氨酸500g國(guó)產(chǎn)
骨肉瘤英文名稱：HOS
氯化鈉血瓊脂基礎(chǔ)/Sodium Chloride Blood Agar Base副溶血性弧菌的溶血試驗(yàn)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
VE(人血管內(nèi)細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
NCI-H226(人肺鱗細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
MDA-MB-436(人腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
BxPC-3(人原位胰腺腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
BC-019(人腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
苞肉牛肉粒/Dried Meat Particle加入苞肉基礎(chǔ)中配成苞肉培養(yǎng)基100克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
硝酸鹽氰化培養(yǎng)基基礎(chǔ)/KCN培養(yǎng)基基礎(chǔ)/Potassium Cyanide Medium Base用于鑒別腸道細(xì)菌KCN抑制試驗(yàn)100克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
NRK(大鼠腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠成年表角質(zhì)形成層細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (100-1500 bp)50 次
dITP 溶液，100mM0.5mL
23-0300-1H-89(PKA 抑制劑 )1mg
120201-25超敏化學(xué)發(fā)光 (HRP) 檢測(cè)試劑盒（ECL）25mL
121002-10綠如蘭核酸染料 ( 可見(jiàn)光型 )10mL
谷胱甘肽 S 轉(zhuǎn)移酶1mg
雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒（Annexin V-APC·7-AAD） 50 次
23-0660-10Simvastatin(HMG-CoA Reductase 抑制劑 )10mg