人胃癌細(xì)胞；SNU-5圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 人胃癌細(xì)胞；SNU-5圖片
形態(tài)特性  上皮樣
生長(zhǎng)特性 多細(xì)胞聚集、懸浮生長(zhǎng)
特征特性  該細(xì)胞來源于一名低分化胃癌患者的轉(zhuǎn)移性腹水，1987年分離建立。該細(xì)胞表達(dá)CEA和TAG-72。 
培養(yǎng)條件  IMDM: Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium  20%FBS
傳代方法  2~3天補(bǔ)液一次。
傳代情況 
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 B類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

膠原酶Ⅳ型100mg
尿道上皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL
CAS596-09-8二熒光素1g
130664-50*熱穩(wěn)定單鏈結(jié)合蛋白50μg 
91203-30一步式胞漿蛋白微量制備試劑盒30 次
尿嘧啶切刻酶50U
一步法無內(nèi)毒素質(zhì)粒 DNAout50 次
CAS573-58-0剛果紅5g
柱式真菌 RNAout50 次
Congo Red 100mg
ATP 酶測(cè)試盒 ( 組織及細(xì)胞膜不需高速離心 )50 T
碘化丙啶苯10mg
CAS62-56-6硫脲25g
70703-50柱式分枝桿菌 DNAout50 次
EGTA 溶液 ,0.5mg/mL, 蛋白10mLNA三化碳酸二脂絡(luò)合物
CARNOSOL鼠尾草酚5957-80-2
LIGHT GREEN SF YELLOWISH亮綠SF(淡黃)5141-20-8
Allyl phenyl ether丙基基1746-13-0
ETHYLLITHIUM乙基鋰811-49-4
Black currant extrac加侖提取物
Swertiamarine獐牙菜苦甙17388-39-5
1-NAPHTHYLAMINE-3,6,8-TRISULFONIC ACID DISODIUM SALT HYDRATE8-氨基1,3,6-萘三磺酸二5398-34-5
Nickel oxide三氧化二鎳1314-06-3
1,2-Dibromopropane1,2-二溴丙烷78-75-1
Bullatine B雪上一枝蒿乙素466-26-2
Dimethyl isophthalate間二酸二酯1459-93-4
Diisooctyl sebacate癸二酸二異酯27214-90-0
ISOPROPYLMAGNESIUM BROMIDE異丙基溴化鎂920-39-8
1,2,5,6,9,10-Hexabromocyclododecane六溴環(huán)十二烷3194-55-6
2-CYANOETHYLTRIETHOXYSILANE3-三乙氧硅基919-31-3
Furfuryl acetate乙酸糠酯623-17-6
N,N-DIETHYL-P-PHENYLENEDIAMINE MONOHYDROCHLORIDEN,N-二乙基對(duì)酸2198-58-5
Lanthanum(III) nitrate hexahydrate酸鑭10277-43-7
4-NITROPHENYL-ALPHA-D-GLUCOPYRANOSIDE對(duì)基-α-D-葡萄糖吡喃苷3767-28-0
1-Naphthylacetamide1-萘乙酰胺86-86-2
6-Hydroxy-2-naphthoic acid6-羥基-2-萘酸16712-64-4
2-(Trifluoromethoxy)aniline鄰氨基三氧基1535-75-7
PONCEAU 6R麗春紅6R5850-44-2
1-Acetyl-4-piperidinecarboxylic acid1-乙?；?4-啶酸25503-90-6
2,6-DIMETHYLHYDROQUINONE2,6-二基-1,4-二酚654-42-2
ZIRCONIUM鋯粉7440-67-7
兔抗雞 IgY，辣根過氧化物酶標(biāo)記300μL
21-0170-5 角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL
90509-5包涵體中量純化試劑盒5次
60906-10cDNA *鏈合成試劑盒10 次
聚乙烯聚吡咯烷酮50g