人肺巨細(xì)胞癌高轉(zhuǎn)移系；PGBE1圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 人肺巨細(xì)胞癌高轉(zhuǎn)移系；PGBE1圖片
形態(tài)特性  上皮細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  PGBE1由朱偉勇和鄭杰于1995年建系。源自人肺巨細(xì)胞癌系分離了多個單細(xì)胞克隆，經(jīng)體外侵襲實驗和裸鼠體內(nèi)接種相結(jié)合進(jìn)行了初步鑒定后，挑選其中３個克隆化細(xì)胞亞系之一。該細(xì)胞在裸鼠體內(nèi)的成瘤率均為１００％，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率為９４％。 
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C7
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR  STR鑒定
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

先鋒溶液 ,100mg/mL1mL
古細(xì)菌種屬鑒定 PCR Mix 1100 次
土鹽10g
生物素標(biāo)記的 Oligo(dT)5μg
CAS9007-49-2鮭魚精 DNA100mg
12-244Novablue(DE3) 菌種1mL
鹽酸壯觀1g
IPTG 溶液，200mg/mL1.5mL
蘇木色精10g
Western 封堵液500mL
CAS75277-39-3N-2- 羥乙基 -N’-2- 乙基磺酸25g
60203-1硫酸新干粉1g
乙酰水楊酸100g
金胺 O5g
D- 氨基葡萄糖鹽10g
一步法 96 孔板質(zhì)粒 DNAout( 真空法 )1次
CAS6342-17-21,4- 雙丙烯酰1g
131020-10Sephacryl S-400 基質(zhì)10mL
中草藥 DNAout100 次
lambda(λ)DNA5μg
過氧化氫酶 ( 牛肝 )1g
雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒（Annexin V-PE·7-AAD） 20 次人尿肌酐(UCR)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人硫酸褪黑色素(MS)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人可溶性血纖蛋白單體復(fù)合物(SFMC)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體(MAG)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人解脲脲原體抗體(UU-Ab)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人基質(zhì)金屬蛋白酶12（MMP-12）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人骨橋素(OPN)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人風(fēng)疹毒抗體(RV-Ab)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人的牛血清白蛋白殘留檢測ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人成纖維細(xì)胞生長因子23(FGF-23)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人白喉抗體(Diphtheria Ab)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人α2纖溶酶抑制物(α2-PI)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人CXC趨化因子受體1(CXCR1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人4羥基壬烯酸（4-HNE）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
犬白細(xì)胞分化抗原8(CD8)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
牛膽酸(Cholic acid)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
雞瘦素(LEP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝