小鼠纖維肉瘤細胞；WEHI-13VAR圖片【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 小鼠纖維肉瘤細胞；WEHI-13VAR圖片
形態(tài)特性  成纖維細胞樣
生長特性 貼壁及懸浮生長
特征特性  在放線菌素D存在下對TNF敏感 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  新生牛血清，10%
傳代方法  1：4-1：6
傳代情況 
凍存條件  基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法（-）
STR 
同工酶 
染色體 
使用權限 A類
細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中，1個月內出現(xiàn)任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

（2R，3R，4S，5R）-5-（6-amino-2-chloro-9H-purin-9-yl）-4-fluoro-2-（hydroxymethyl）oxolan-3-olClofarabine
2H-Pyrido[1’，2’:4，5]pyrazino[2，1-b][1，3]oxazine-9-carboxamide， N-[（2，4-difluorophenyl）methyl]-3，4，6，8，12，12a-hexahydro-7-hydroxy-4-methyl-6，8-dioxo-， （4R，12aS）-GSK1349572
（2R，3R，4R，5S）-1-（2-Hydroxyethyl）-2-（-（hydroxymethyl）piperidine-3，4，5-triol； N-（2-Hydroxyethyl）-1-deoxynojirimycin； BAY-1099Miglitol
（S）-4-methyl-N-（（S）-1-（（S）-4-methyl-1-（（R）-2-methyloxiran-2-yl）-1-oxopentan-2-ylamino）-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl）-2-（（S）-2-（2-morpholinoacetamido）-4-phenylbutanamido）pent*； PR-171Carfilzomib
1-Daminozide
4-[[4-Oxo-2-thioxo-3-[3-trifluoromethyl）phenyl]-5-thiazolidinylidene]methyl]benzoic acid； CFTR（inh）-172CFTR Inhibitor-172
2-Amino-8-ethyl-4-methyl-6-（lH-pyrazol-5-yl）pyrido[2，3-d]pyrimidin-7（8H）-one； SAR245409XL765
（S）-N-（4-（2-（（4-morpholinophenyl）amino）pyrimidin-4-yl）phenyl）pyrrolidine-2-carboxamideXL019
2，3，4，5-Tetrahydro-7-hydroxy-1H-benzofuro[2，3-c]azepin-1-oneCID-755673
（2R，Phleomycin
Annexin V-PE-Cy5 ReagentAnnexin V-PE-Cy5 Reagent
Protein A-AgaroseHi-Bind Protein A-AgaroseHGACL-009Hs578T人乳腺癌細胞1×1061ml/T751050 元
HRCL-005HLF-a人肺細胞1×1061ml/T751500 元
EMCL-002UMNSAH/DF-1雞胚成纖維細胞1×1061ml/T751400 元
HEMCL-015HFTF人胚胎眼Tenon囊成纖維細胞1×1061ml/T751500 元
HICL-001TE353.SK人正常皮膚細胞1×1061ml/T751500 元
HIMCL-056KG-1a人急性骨髓白血病細胞1×1061ml/T751400 元
HRCL-015NCI-H2227人小細胞肺癌細胞1×1061ml/T751500 元
ICL-002GP-S2豚鼠皮質細胞1×1061ml/T751500 元
ICL-037TS-ES-1樹鼩胎皮成纖維樣細胞1×1061ml/T751500 元
MIMCL-012P388D1（IL-1）小鼠淋巴瘤細胞1×1061ml/T751000 元
RCL-022OAR-L1綿羊肺細胞1×1061ml/T751200 元
UCL-028CRFK貓腎細胞1×1061ml/T751400 元
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