小鼠胚胎成纖維細胞；BALB/3T3 clone A31*操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。

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細胞名稱
形態(tài)特性  成纖維細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性  Contact-inhibited semi-normal cell line 
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%
傳代方法  消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件  *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類

運輸保存：
采用干冰保存運輸。收到細胞時，若干冰已經(jīng)*融化，請立即將細胞復(fù)蘇培養(yǎng)；若尚留有干冰，請立即將細胞放入液氮中保存待用，請按條件貯存細胞，切不可將細胞置于高溫環(huán)境。
保存條件：4℃保存一年;-20℃長期保存
用途：只可用于科研。
儲存：液氮。
運輸：干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基，這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養(yǎng)實驗室通常在周一，周三，周五更換培養(yǎng)基。
注意：*次植入后，在6-16小時內(nèi)更換培養(yǎng)基，以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細胞。到達客戶手中，出現(xiàn)任何問題（人為或者非人為），導(dǎo)致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。對于細胞的真實性，支持客戶檢測對應(yīng)的biomarker，（如證明細胞錯誤，全額退款。）公司針對每株細胞，鑒定gene background，鑒定完成的細胞可以提供數(shù)據(jù)，用于證明細胞的真實性，并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧毎匦浴?/p>

1’-Naphthoyl-2-methylindole （25 mg）（2-methyl-1H-indol-3-yl）-1-naphthalenyl-methanone； 1’-Naphthoyl-2-methylindole
Akt Inhibitor X （1 mg）2-chloro-N，N-diethyl-10H-phenoxazine-10-butanamine， monohydrochloride； Akt Inhibitor X
Meloxicam （100 mg）4-hydroxy-2-methyl-N-（5-methyl-2-thiazolyl）-1，1-dioxide-2H-1，2-benzothiazine-3-carboxamide； Coxicam|UH-AC 62XX； Meloxicam
Furin Inhibitor I （500 ug）N2-（1-oxodecyl）-L-arginyl-L-valyl-N-[（1S）-4-[（aminoiminomethyl）amino]-1-（2-chloroacetyl）butyl]-L-lysinamide； Decanoyl-Arg-Val-Lys-Arg-CMK； Furin Inhibitor I
PF-05274857 （hydrochloride） （10 mg）1-（4-（5’-chloro-3，5-dimethyl-[2，4’-bipyridin]-2’-yl）-piperazin）-3-（methylsulfonyl）-1-propanone， monohydrochloride； PF-05274857 （hydrochloride）
ADBICA N-pentanoic acid metabolite （5 mg）5-（3-（（1-amino-3，3-dimethyl-1-oxobutan-2-yl）carbamoyl）-1H-indol-1-yl）pentanoic acid； ADBICA N-pentanoic acid metabolite
1，2-Distearoyl-sn-glycero-3-PC （250 mg）1，2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphatidylcholine； 1，2-DSPC|Coatsome MC 8080|1，2-Distearoyl-sn-glycero-3-Phosphocholine； 1，2-Distearoyl-sn-glycero-3-PC
Anatabine （tartrate） （50 mg）1，2，3，6-tetrahydro-2，3’-bipyridine 2，3-dihydroxysuccinate； Anatabine （tartrate）
ML-239 （5 mg）（2E）
ID-8 （25 mg）1-
tetranor-PGDM AChE Tracer （500 dtn）tetranor-PGDM AChE Tracer
22（R）-hydroxy Cholesterol （5 mg）cholest-5-ene-3β，22R-diol； Narthesterol； 22（R）-hydroxy Cholesterol
Pentadecanoyl Ethanolamide （100 mg）N-（2-hydroxyethyl）-pentadec*； Pentadecanoyl Ethanolamide
Cell-Based Assay Neutrophil Isolation Histopaque （25 ml）Cell-Based Assay Neutrophil Isolation Histopaque
4-hydroxy Nonenal-d3 （50 ug）（±）-4-hydroxy-9，9，9-d3-non-2E-enal； 4-HNE-d3； 4-hydroxy Nonenal-d3
Corilagin （5 mg）cyclic 3,6-[（1R）-4,4’,5,5’,6,6’-hexahydroxy[1,1’-biphenyl]-2,2’-dicarboxylate] 1-（3,4,5-trihydroxybenzoate）-β-D-glucopyranose磷酸二酯酶Ⅰ100U
GSH—PX 測試盒50 T
CAS9026-00-0膽固醇酯酶100U
131147-100山羊抗大鼠 IgG(H+L)，堿性磷酸酶標(biāo)記100μL
3071-250血液 RNAout 250 次
木聚糖2.5g
4% 多聚甲醛250 mL
尿道上皮細胞生長因子5mL
BCIP-NBT 法地高雜交檢測試劑盒5次
21-0270-5 前列上皮細胞生長因子5mL
70607-100RNase-free Tris HCl,1M,pH 8.0100mL
PFG 固定液250 mL
BAY11-7082(NF-κB 抑制劑 )2mg
L-Arginine(NO 前體 )5g
亞硫修飾的 DNA100 次
23-0390-10Leptomycin B( 出核轉(zhuǎn)運抑制劑 )10μg
3672-50植物 DNAout50 次
Cre 重組酶50U
dNTP 溶液，100mM 0.5mL
0.5mLDNA 離心超濾管 (300-500 KD)1個
130596-200熒光染色細胞凋亡檢測試劑盒200 次
130514-2硅基磁珠2mL