雜交瘤細(xì)胞；1F2圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 雜交瘤細(xì)胞；1F2圖片
形態(tài)特性  淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 半貼壁生長(zhǎng)
特征特性  該細(xì)胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開(kāi)。 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C2
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 未定
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

組織蛋白酶K(CTSK)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Cathepsin K (CTSK)
雌激素受體β(ERβ)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Estrogen Receptor Beta (ERb)
腦鈉素(BNP)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Brain Natriuretic Peptide (BNP)
髓過(guò)氧化物酶(MPO)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Myeloperoxidase (MPO)
鈉/鉀離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATP酶β3肽(ATP1β3)單克隆抗體Monoclonal Antibody to ATPase, Na+/K+ Transporting Beta 3 Polypeptide (ATP1b3)
90kDa熱休克蛋白β1(HSP90β1)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Heat Shock Protein 90kDa Beta 1 (HSP90b1)
視黃醇結(jié)合蛋白4(RBP4)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Retinol Binding Protein 4, Plasma (RBP4)
整合素α2B(ITGα2B)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Integrin Alpha 2B (ITGa2B)
蛋白酪氨酸磷酸酶受體S(PTPRS)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Protein Tyrosine Phosphatase Receptor Type S (PTPRS)
山梨醇脫氫酶(SDH)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Sorbitol Dehydrogenase (SDH)
B-細(xì)胞激活因子(BAFF)單克隆抗體Monoclonal Antibody to B-Cell Activating Factor (BAFF)
蛋白激酶Cα(PKCα)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Protein Kinase C Alpha (PKCa)
干擾素誘導(dǎo)T-細(xì)胞α亞族趨化劑(ITαC)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Interferon Inducible T-Cell Alpha Chemoattractant (ITaC)
鈣蛋白酶2(CAPN2)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Calpain 2, Large Subunit (CAPN2)
去甲腎上腺素轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(NET)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Norepinephrine Transporter (NET)
鞘氨醇1磷酸酯受體1(S1PR1)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Sphingosine 1 Phosphate Receptor 1 (S1PR1)
尿皮質(zhì)素3(UCN3)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Urocortin 3 (UCN3)
細(xì)胞色素P450家族成員2D6(CYP2D6)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Cytochrome P450 2D6 (CYP2D6)
芳香烴受體核轉(zhuǎn)位因子樣蛋白(ARNTL)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Aryl Hydrocarbon Receptor Nuclear Translocator Like Protein (ARNTL)200 次    柱式血液 DNAout    
10mL    制霉菌素溶液 ,2mg/mL    
ATP 酶測(cè)試盒 ( 組織及細(xì)胞膜不需高速離心 )    18-0020-50    50 T
DNA  PVP K30 溶液，20%    100865-100    100mL
5000U    SP6 RNA 聚合酶    
100 次    DNA PAGE 膠回收試劑盒    
1.5mL    酵母 tRNA 溶液 B( 精提 )    
1mL    JM103 菌種    
p19miRNA 檢測(cè)試劑盒     130703-50    50 次
0.5mL DNA 離心超濾管 (90-150 KD)    120668C-1    1個(gè)
250mg    四氮唑藍(lán) (NBT)    
5次    大提柱式 Ti 質(zhì)粒 DNAout    
25 次    一站式真菌 mRNAout    
10mL    膦酰二肽溶液，10mg/mL    
NotI    17-0160    150U
顯影粉    130808-1    1袋
100 次     胎盤堿性磷酸酶檢測(cè)試劑盒    
25mg    多聚 -L- 賴氨酸 (3-7 萬(wàn) )    
1只    硅膠膜離心吸附柱 ( 大提 ) 收集管    
10000U    核糖核酸酶 RNase If    
RACE 技術(shù)服務(wù)    R004-1    1次
ATP 溶液，2.5mM    131216-2    2mL