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當前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>ATCC細胞>>小鼠源細胞>> 雜交瘤細胞;AMVP圖片
參 考 價 | 面議 |
產(chǎn)品型號
品 牌ATCC
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時間:2017-01-23 14:00:39瀏覽次數(shù):294次
聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)雜交瘤細胞;AMVP圖片【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 雜交瘤細胞;AMVP圖片
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 該細胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質(zhì)量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
小鼠上皮中粒細胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA Kit
小鼠血紅素氧合酶1(HO-1)ELISA Kit
鴨白介素6(IL-6)ELISA Kit
豬單核細胞增多李斯特菌素O((LLO)ELISA Kit
豬孕酮(P4)ELISA試劑盒
DNAGuSCN
α-糜蛋白酶
菌素D
藍色葡聚糖 2000
葡聚糖
胃蛋白酶1:3000
植物血球凝集素P
Butyl alcohol(1-丁醇、正丁醇)
乙酸溶液,0.5%(v/v)
鉻-醋酸固定液,中濃度
Weigert法蘇木精染色試劑盒
Luxol堅牢藍油紅O染色法神經(jīng)組織染色試劑盒
Ackerman 血涂片的隱脂類的蘇丹B法類脂染色試劑盒
Lillie亞鐵反應法色素染色試劑盒
Kuper-May熒光抗酸法抗酸桿菌染色試劑盒Rabbit Anti-dog IgG/APC APC標記的兔抗狗IgG規(guī)格: 0.1ml
GRO gamma/CXCL3 生調(diào)節(jié)致基因gamma(GROγ)抗體規(guī)格: 0.1ml
IL-9 白介素9抗體規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-Biotin/HRP 辣根過氧化物酶標記的兔抗生物素抗體IgG規(guī)格: 0.1ml
AIM2 干擾素誘導蛋白AIM2抗體規(guī)格: 0.1ml
ANGPT3/ANG3/ANGPT4/ANG4 血管生成素3/血管生成素4抗體規(guī)格: 0.1ml
Mouse Anti-rat IgG/PE PE標記的小鼠抗大鼠IgG規(guī)格: 0.1ml
Galanin 神經(jīng)節(jié)肽抗體規(guī)格: 0.2ml
ANGL2/ANGPTL2 血管生成素樣蛋白2抗體規(guī)格: 0.1ml
Mouse Anti-human IgG/Cy5.5 Cy5.5標記的小鼠抗人IgG規(guī)格: 0.1ml
FLIP/c FLIP 凋亡調(diào)節(jié)基因之一抗體規(guī)格: 0.1ml
ANKRD54 錨蛋白重復域54抗體規(guī)格: 0.2ml
Goat Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的羊抗豚鼠IgG規(guī)格: 0.1ml
Phospho-FAK(Tyr576/577) 磷酸化粘著斑激酶抗體規(guī)格: 0.1ml
FAM150A FAM150A蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
Goat Anti-Bovine IgG/PE-CY5 PE-CY5標記的羊抗牛IgG規(guī)格: 0.1ml
phospho-MEK1/MAP2K1(Thr386) 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1抗體規(guī)格: 0.1ml
CCDC54/NYD-SP17 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白54抗體規(guī)格: 0.2ml
Goat Anti-Mouse IgG 羊抗小鼠IgG規(guī)格: 1mg
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