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            上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
            中級(jí)會(huì)員 | 第10年

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            小鼠雜交瘤細(xì)胞NC-4D12圖片

            參  考  價(jià)面議
            具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

            產(chǎn)品型號(hào)

            品       牌ATCC

            廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

            所  在  地上海市

            更新時(shí)間:2017-01-23 13:54:48瀏覽次數(shù):333次

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            小鼠雜交瘤細(xì)胞NC-4D12圖片售后:收到細(xì)胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

            小鼠雜交瘤細(xì)胞NC-4D12圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
            細(xì)胞名稱 小鼠雜交瘤細(xì)胞NC-4D12圖片
            形態(tài)特性  淋巴母細(xì)胞樣
            生長特性 懸浮生長
            特征特性  該細(xì)胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開。 
            培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
            傳代方法  1:3傳代,3-4天傳1次
            傳代情況 C5
            凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
            支原體檢測 陰性
            STR 
            同工酶 
            染色體 
            使用權(quán)限 未定
            細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
            一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
            1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
            2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
            3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
            二、細(xì)胞處理:
            1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
            2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
            對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
            1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
            2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
            3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
            4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
            對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
            方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
            方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
            3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
            質(zhì)量保證:    
            我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
            操作步驟:
            1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
            2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

            羥基脲    1g    
            嗜熱菌蛋白酶    25mg    
            CAS10034-99-8    硫酸鎂七水    100g
            100835-1    胃蛋白酶抑制劑溶液,1 mg/mL    1mL
            柱式凝固血液 DNAout    50 次    
            馬來酸    100g    
            ATP 溶液,1mM    1mL    
            DNA 上樣液 ( 紅 ),6×    10mL    
            JM83 菌種    1mL    
            60609-200    T4 DNA 連接酶    200U
            91202-50    雙酶一管式 RT-PCR 試劑盒 (MMLV-Taq)    50 次
            Wortmannin(PI3K 抑制劑 )    0.5mg    
            H-89(PKA 抑制劑 )    1mg    
            L- 天門冬酰胺    25g    
            多聚甲醛 - 氫氧化固定液    250 mL    
            CAS21931-53-3    尿苷 -5'- 二磷酸    25mg
            19-0110-500     IMDM 培養(yǎng)基 ( 含 1% 雙抗 )    500mL
            130930-10    百萬堿基血液 DNAout    10 次
            秋水仙素    100mg    
            DAB 法生物素雜交試劑盒    5次   CHO-K1(倉鼠卵巢細(xì)胞亞株)5×106cells/瓶×2
            FLAG標(biāo)簽免疫親和介質(zhì)125ul國產(chǎn)
            小鼠視網(wǎng)膜色素上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
            BC-021(人腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
            小鼠腸粘膜上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
            7.5% NaHCO3溶液規(guī)格:100ml
            人胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
            McCown Woody Plant Vit Mix(Modified)BR100毫升國產(chǎn)/進(jìn)口
            人卵巢紫杉醇耐藥株英文名稱:A2780/Taxol
            醋酸鉛培養(yǎng)基/乙酸鉛培養(yǎng)基/Lead Acetate Medium用于細(xì)菌的硫化氫試驗(yàn)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
            前列腺英文名稱:LNCaP
            蠟樣芽孢桿菌計(jì)數(shù)顯色培養(yǎng)基250克國產(chǎn)/進(jìn)口
            大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(未分化)英文名稱:PC-12(未分化)
            肉浸液肉湯培養(yǎng)基/肉浸液肉湯/Meat Infusion Broth溶血性鏈球菌、蠟樣芽孢桿菌和金黃色葡萄球菌的增菌培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
            V79(倉鼠肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
            胰酪胨大豆酵母浸膏瓊脂/胰酶大豆酵母浸膏瓊脂/TSA-YE/TSYEA用于單核細(xì)胞和李斯特氏菌的分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
            RSC, 大鼠雪旺細(xì)胞 

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