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            小鼠正常食管上皮細(xì)胞;MNEEC/HL-009圖片

            參  考  價(jià)面議
            具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

            產(chǎn)品型號

            品       牌ATCC

            廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

            所  在  地上海市

            更新時(shí)間:2017-01-23 13:51:15瀏覽次數(shù):274次

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            小鼠正常食管上皮細(xì)胞;MNEEC/HL-009圖片售后:收到細(xì)胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

            小鼠正常食管上皮細(xì)胞;MNEEC/HL-009圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。

            細(xì)胞名稱 小鼠正常食管上皮細(xì)胞;MNEEC/HL-009圖片
            形態(tài)特性  上皮樣
            生長特性 貼壁生長
            特征特性  該細(xì)胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開。 
            培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
            傳代方法  1:3傳代,3-4天傳1次
            傳代情況 C5
            凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
            支原體檢測 陰性
            STR 
            同工酶 
            染色體 
            使用權(quán)限 未定

            細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
            一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
            1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
            2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
            3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
            二、細(xì)胞處理:
            1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
            2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
            對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
            1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
            2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
            3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
            4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
            對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
            方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
            方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
            3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
            質(zhì)量保證:    
            我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
            操作步驟:
            1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
            2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

            GBP5/Guanylate binding protein 5  鳥嘌呤核苷酸結(jié)合蛋白5抗體規(guī)格: 0.2ml
            RIP2  受體結(jié)合絲氨酸蘇氨酸激酶2抗體規(guī)格: 0.2ml
            CD31/PECAM-1  血小板內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子-1抗體規(guī)格: 0.1ml
            BMP9  骨形態(tài)發(fā)生蛋白9抗體規(guī)格: 0.2ml
            Phospho-PTEN(Ser385)  磷酸化瘤抑制基因PTEN抗體規(guī)格: 0.1ml
            CCR10  細(xì)胞表面趨化因子受體10抗體規(guī)格: 0.1ml
            MAGEA10  黑色素瘤相關(guān)抗原10抗體規(guī)格: 0.2ml
            PPIL1  親環(huán)素相關(guān)蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml
            Caspase-6 (NT)  半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗體(N端)規(guī)格: 0.1ml
            PNPLA6/NTE  含patatin樣磷脂酶6抗體規(guī)格: 0.1ml
            PI 3 Kinase p85 beta  磷脂酰肌醇激酶p85β抗體規(guī)格: 0.1ml
            phospho-B-Raf (Ser446)  磷酸化B-Raf抗體規(guī)格: 0.1ml
            Destrin 19/ADF  肌動蛋白解聚因子19抗體規(guī)格: 0.1ml
            Phospho-PDGFRA(Tyr1018)  磷酸化血小板源性生因子受體-α抗體規(guī)格: 0.1ml
            phospho-SCNN1B(Ser633)   磷酸化上皮鈉通道β2抗體規(guī)格: 0.1ml
            FAM129A/Cell growth inhibiting gene 39 protein  細(xì)胞生抑制基因39蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
            Phospho-p90RSK(Ser380)  磷酸化絲氨酸/蘇氨酸激酶p90RSK蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml總測試盒 / 總脂酶測試盒    24T    18-0780-24
            Denhardt 溶液,50×    100mL    91104A-100
            200U        Therminator γ DNA 聚合酶
            15 次        非酶 DNA 清除劑 -2
            1g        L- 谷胱甘肽 ( 氧化型 )
            100 次        植物種屬鑒定 PCR Mix 7
            氯化    100g    CAS7447-40-7
            增強(qiáng)型 DAB 顯色試劑盒    100mL    81223-100
            大提柱式 DNA 清除劑    5次    90802-5
            5μg        Oligo dT12-18 引物,0.5μg/μL
            50mg        Carboxy-PTIO( 一氧化氮清除劑 )
            10mL        一步式廣譜 DNAout
            50mL        SP 交換介質(zhì)
            生物素化蛋白 L    0.5mg    131101-0.5
            接頭 DNA(Hind Ⅲ -Sma I)    5nmol    130987C-5
            200mL        小鼠白細(xì)胞分離液 1.093
            50 次        即用型多重 PCR 試劑盒
            100mg        5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚 -β-D- 半乳糖苷

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