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            上海谷研實業(yè)有限公司
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            雜交瘤細胞株;49-2圖片

            參  考  價面議
            具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)

            產(chǎn)品型號

            品       牌ATCC

            廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

            所  在  地上海市

            更新時間:2017-01-23 13:51:01瀏覽次數(shù):299次

            聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)
            雜交瘤細胞株;49-2圖片售后:收到細胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運輸?shù)仍颍r,應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報告并及時傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

            雜交瘤細胞株;49-2圖片【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。

            細胞名稱 雜交瘤細胞株;49-2圖片
            形態(tài)特性  淋巴母細胞樣
            生長特性 懸浮生長
            特征特性  該細胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開。 
            培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
            傳代方法  1:3傳代,3-4天傳1次
            傳代情況 C5
            凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
            支原體檢測 陰性
            STR 
            同工酶 
            染色體 
            使用權(quán)限 未定

            細胞培養(yǎng)步驟:
            一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
            1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
            2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
            3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
            二、細胞處理:
            1、復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度。
            2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
            對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
            1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
            2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
            3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
            4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
            對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
            方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
            方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
            3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應(yīng)將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
            質(zhì)量保證:    
            我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
            操作步驟:
            1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
            2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

            TPA/PLAT  組織型纖溶酶原激活劑抗體規(guī)格: 0.1ml
            phospho-CHEK1 (Ser280)  磷酸化細胞周期檢測點激酶1抗體規(guī)格: 0.1ml
            stabilin1/STAB 1  淋巴管內(nèi)皮細胞和血管內(nèi)皮細胞受體1抗體規(guī)格: 0.2ml
            Phospho-SHP2/SHIP2(Tyr81)  磷酸化蛋白酪氨酸磷酸酶2抗體規(guī)格: 0.1ml
            Cdc6  細胞分裂周期蛋白6抗體規(guī)格: 0.1ml
            TNFAIP2  瘤壞死因子誘導(dǎo)蛋白2(TNFα-IP 2)抗體規(guī)格: 0.2ml
            Phospho-RSK3 (Thr353/356)  磷酸化核糖體蛋白S6激酶家族RSK3抗體規(guī)格: 0.1ml
            CD43/SPN  CD43抗體規(guī)格: 0.1ml
            KDEL (ER Marker)  賴氨酸,天冬氨酸,谷氨酸,亮氨酸相關(guān)序列抗體規(guī)格: 0.2ml
            ALDH2/ALDHI  乙醛脫氫酶2抗體規(guī)格: 0.2ml
            phospho-NDEL1(Thr219)  磷酸化中心粒蛋白Nudel抗體規(guī)格: 0.1ml
            Nucleostemin  核干細胞因子抗體(鳥嘌呤核苷酸結(jié)合蛋白3)規(guī)格: 0.2ml
            X protein/HB-X (middle)  抗乙肝病毒X蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
            Protective protein  組織蛋白酶A抗體規(guī)格: 0.1ml
            ZNF23  鋅指蛋白23抗體規(guī)格: 0.2ml
            Phospho-PLC gamma 2(Tyr753)  磷酸化磷酯酶Cγ2抗體規(guī)格: 0.1ml
            phospho-RAD9(Ser328)  磷酸化細胞周期檢查控制蛋白質(zhì)抗體規(guī)格: 0.1ml
            AQP0/MIP26  水通道蛋白0抗體規(guī)格: 0.1ml2mL        殼聚糖磁珠
            1g        α- 糜蛋白酶
            100mL        DMEM 培養(yǎng)基 ( 高糖,含 10% 胎牛血清 )
            50 次        柱式植物油 DNAout
            基因轉(zhuǎn)染增強劑    0.5 mL    140621-0.5
            DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) 200-1500 bp)    50 次    70503C-50
            50μL        生物素標(biāo)記 dUTP 溶液
            100mL        電泳甘油
            10mg        apo- 轉(zhuǎn)鐵蛋白
            50U        Furin 蛋白酶
            金胺 O    5g    CAS2465-27-2
            lambda(λ)DNA    5μg    90407C-5
            50mg        小牛胸 DNA
            50 只        硅膠膜離心吸附柱 ( 小提 ) 收集管
            25mL        聚乙二醇溶液
            10mL        Sephadex G50 介質(zhì)
            四甲基乙二胺    25mL    CAS110-18-9
            TG1 菌種    1mL    12-44
            50 次        一步法質(zhì)粒 DNAout 2.0
            0.5 mL        基因轉(zhuǎn)染增強劑
            10g        甘氨酸二肽
            50 次        脈沖電泳 Marker( 酵母染色體 PFG)

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