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            上海谷研實業(yè)有限公司
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            小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-L1圖片

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            具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)

            產(chǎn)品型號

            品       牌ATCC

            廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

            所  在  地上海市

            更新時間:2017-01-23 13:49:15瀏覽次數(shù):403次

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            小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-L1圖片售后:收到細(xì)胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r,應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報告并及時傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

            小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-L1圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。

            細(xì)胞名稱 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-L1圖片
            形態(tài)特性  成纖維細(xì)胞樣
            生長特性 貼壁生長
            特征特性  3T3-L1是從3T3細(xì)胞(Swiss albino)中經(jīng)克隆分離得到的連續(xù)傳代的亞系。該細(xì)胞從快速分裂到匯合和接觸性抑制狀態(tài)經(jīng)歷了前脂肪細(xì)胞到脂肪樣細(xì)胞的轉(zhuǎn)變。該細(xì)胞鼠痘病毒陰性;可產(chǎn)生甘油三酯,高濃度血清可增強(qiáng)細(xì)胞內(nèi)脂肪堆積。 
            培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  15%NBS
            傳代方法  1:3傳代;3-4天一次
            傳代情況 PN3
            凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
            支原體檢測 熒光法(-)
            STR  -
            同工酶 
            染色體  68-72
            使用權(quán)限 A類

            細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
            一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
            1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
            2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
            3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
            二、細(xì)胞處理:
            1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
            2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
            對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
            1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
            2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
            3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
            4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
            對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
            方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
            方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
            3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
            質(zhì)量保證:    
            我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
            操作步驟:
            1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
            2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

            Rabbit Anti-human IgG/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗人IgG規(guī)格: 0.1ml
            Hes5  發(fā)狀分裂相關(guān)增強(qiáng)子-5抗體規(guī)格: 0.2ml
            HN1/ARM2  雄激素調(diào)節(jié)蛋白2抗體規(guī)格: 0.2ml
            Rabbit Anti-Goat IgG/RBITC  羅丹明標(biāo)記的兔抗羊IgG規(guī)格: 0.3ml
            GYG1  糖原蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml
            MEPE  細(xì)胞外基質(zhì)磷酸化抗體規(guī)格: 0.2ml
            Rabbit Anti-Bovine IgM/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗牛IgM規(guī)格: 0.1ml
            GlyR alpha 1/2/3  甘氨酸受體alpha 1/2/3型抗體規(guī)格: 0.1ml
            TET1/CXXC6  Ten-eleven轉(zhuǎn)運(yùn)基因1蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
            Mouse Anti-Bov IgG/PE-Cy3  PE-Cy3標(biāo)記的小鼠抗牛IgG規(guī)格: 0.1ml
            phospho-GATA1(ser310)  磷酸化珠蛋白轉(zhuǎn)錄因子1抗體規(guī)格: 0.1ml
            BRD1  BRD1蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
            Mouse Anti-human IgM/PE  PE標(biāo)記的小鼠抗人IgM規(guī)格: 0.1ml
            FoxP3  叉蛋白P3抗體規(guī)格: 0.1ml
            TMEM147  跨膜蛋白147抗體規(guī)格: 0.2ml
            Goat Anti-Chicken IgG/Cy7  Cy7標(biāo)記的羊抗雞IgG規(guī)格: 0.1ml
            APOC2  載脂蛋白C2抗體規(guī)格: 0.1ml
            CADM2/IGSF4D/Cell adhesion molecule 2  細(xì)胞粘附分子2規(guī)格: 0.2ml
            Goat Anti-Mouse IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標(biāo)記的羊抗小鼠IgG規(guī)格: 0.1ml
            WASF1/WAVE 1  WAVE1蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml100mL        RNase-free CTAB 溶液 ,20%
            30 次        超快非醇核酸沉淀劑
            50 次        真菌 RNAout
            10mL        絲裂 C 溶液 ,5mg/mL
            ATP 檢測試劑盒    200 次     18-0010-200
            DNA 異硫氰酸胍溶液,5M    100mL    100902-100
            1000U        SP6 RNA 聚合酶
            10 次        DNA 5’末端標(biāo)記試劑盒
            1.5mL        酵母 tRNA 溶液 A( 粗提 )
            1mL        JM101 菌種
            p19siRNA 結(jié)合蛋白     1000U    130702-1000
            0.5mL DNA 離心超濾管 (30-50 KD)    1個    120668B-1
            15 次        絲狀真菌線粒體 DNAout
            5次        大提柱式 DNA 清除劑
            30 次        石蠟包埋組織 RNAout
            5mL        AEBSF 溶液,10mg/mL
            NdeI    400U    17-0150
            顯影定影套裝    1套    130807-1
            500mL        胎牛血清(北美特)

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