大鼠肝癌細(xì)胞；RH-35圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

細(xì)胞名稱 大鼠肝癌細(xì)胞；RH-35圖片
形態(tài)特性  上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  RH-35細(xì)胞株源自由N-2feuorenyldiuctamid在雄性AxC大鼠中誘導(dǎo)的可移植Reulier H-35肝癌。 細(xì)胞較小，提供者稱饑餓24小時(shí)可以使其同步。 
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  胎牛血清，10%
傳代方法  消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。
傳代情況 PN
凍存條件  *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測(cè) 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

人細(xì)胞纖維連接試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T人細(xì)胞纖維連接試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人細(xì)胞纖維連接試劑盒、人細(xì)胞纖維連接elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月。
小鼠高鐵血紅試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T小鼠高鐵血紅試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠高鐵血紅試劑盒、小鼠高鐵血紅elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月。
兔子內(nèi)皮1試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T兔子內(nèi)皮1試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子內(nèi)皮1試劑盒、兔子內(nèi)皮1 elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月。
豬基質(zhì)金屬酶抑制1試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T豬基質(zhì)金屬酶抑制1試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豬基質(zhì)金屬酶抑制1試劑盒、豬基質(zhì)金屬酶抑制1 elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月。
豬葡萄轉(zhuǎn)運(yùn)2試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T豬葡萄轉(zhuǎn)運(yùn)2試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豬葡萄轉(zhuǎn)運(yùn)2試劑盒、豬葡萄轉(zhuǎn)運(yùn)2 elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月。1mL    牛血清白蛋白標(biāo)準(zhǔn)品，2mg/mL    
D- 葡萄糖 -1- 磷酸二    CAS150399-99-8    1g
菌種保存液    100827B-10    10 管
10g    伊紅 Y, 醇溶性    
100mL    交聯(lián)瓊脂糖凝膠 6B    
1g    2,6- 二氯酚靛酚    
0.1mg    山羊抗小鼠 IgG，熒光素 555 標(biāo)記    
氨基 10B    CAS1064-48-8    5g
小鼠抗 V5 標(biāo)簽單抗    130578-1000    1000μL
250 次    植物 RNAout    
1g    L- 谷胱甘肽 ( 氧化型 )    
500g    酵母浸膏    
0.1 mL×10    OmniMAX2-T1 Phage Resistant 感受態(tài)細(xì)胞    
葡聚糖凝膠 G-25 中顆粒    CAS9041-35-4    25g
免疫蛋白清除劑    130882-20    20 次
50 次    柱式真菌 DNAout    
5g    硫酸鏈    
250U    天門冬酰胺酶    
1500U    XbaI    
天門冬酰胺酶    CAS9015-68-3    250U
COX IV 小鼠單抗    140594-1000    1000 μL
動(dòng)物 RNAout(TRIzol)     3070-100    100mL
兔子內(nèi)皮抑試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T兔子內(nèi)皮抑試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子內(nèi)皮抑試劑盒、兔子內(nèi)皮抑elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月。