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            上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
            中級(jí)會(huì)員 | 第10年

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            豬睪丸細(xì)胞;ST說明書

            參  考  價(jià)面議
            具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

            產(chǎn)品型號(hào)

            品       牌ATCC

            廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

            所  在  地上海市

            更新時(shí)間:2017-01-23 14:11:55瀏覽次數(shù):484次

            聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 化工儀器網(wǎng)
            豬睪丸細(xì)胞;ST說明書售后:收到細(xì)胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

            豬睪丸細(xì)胞;ST說明書【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。

            細(xì)胞名稱 豬睪丸細(xì)胞;ST說明書
            形態(tài)特性  成纖維細(xì)胞樣
            生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
            特征特性  該細(xì)胞為二倍體,對(duì)豬細(xì)小病毒、腸道病毒敏感。 
            培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
            傳代方法  1:3-1:8,每周換液2次
            傳代情況 P120
            凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
            支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
            STR 
            同工酶 
            染色體 
            使用權(quán)限 A類

            細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
            一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
            1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
            2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
            3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
            二、細(xì)胞處理:
            1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
            2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
            對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
            1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
            2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
            3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
            4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
            對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
            方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
            方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
            3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
            質(zhì)量保證:    
            我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè),100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
            操作步驟:
            1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
            2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

            UM-UC-3(人膀胱移行細(xì)胞)    5×106cells/瓶×2            
            胰月示-亞硫酸鹽-環(huán)絲氨酸瓊脂基礎(chǔ)/TSC瓊脂/TSC Agar    產(chǎn)氣莢膜梭菌的平板計(jì)數(shù)    國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口    250克    
            RN-h, 大鼠海馬趾神經(jīng)元                
            HS 683(人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞)    5×106cells/瓶×2            
            NCI-H23(人非小細(xì)胞肺細(xì)胞)    5×106cells/瓶×2    gersion        
            小鼠海馬神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞(EGFP標(biāo)記)                
            水楊苷發(fā)酵管    BR    國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口    20支    
            Hacat(人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞)    5×106cells/瓶×2            
            G-401(人腎Wilms細(xì)胞)    5×106cells/瓶×2            
            MuM-2C(人眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞)    5×106cells/瓶×2    gersion        
            S-180(小鼠肉瘤細(xì)胞)    5×106cells/瓶×2            
            Inclusion body Denature Reagent/包涵體蛋白溶解液    100ml        國(guó)產(chǎn)    
            COLO 205(人結(jié)腸細(xì)胞)    5×106cells/瓶×2            
            G-401(人腎Wilms細(xì)胞)    5×106cells/瓶×2            
            小鼠胎兒表角質(zhì)形成層細(xì)胞*培養(yǎng)基    100mL            
            BCA蛋白定量試劑盒    500次        國(guó)產(chǎn)    
            小鼠成纖維細(xì)胞    英文名稱:        3T3    
            胰酶細(xì)胞消化液(含酚紅)    規(guī)格:        100ml  1mL    植物蛋白酶抑制劑    
            綠豆核酸酶    120408-1000    1000U
            雜交袋    90206-20    20 個(gè)
            50L    Tricine-SDS-PAGE 陰極電泳液 ( 干粉 )    
            100 次    動(dòng)物種屬鑒定 PCR Mix 4    
            50 次    DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (3)φX174 DNA/Hae Ⅲ    
            100U    DNA 促旋酶 (E.coli)    
            D- 甘露醇    CAS69-65-8    250g
            十二烷基磺酸    131049-100    100g
            50 次    柱式水樣 DNAout    
            10mg    莽草酸    
            100g    矮壯素    
            100mL    RNase-free CTAB 溶液 ,20%    
            1mL    Y187 酵母種    
            ATP 依賴的 DNase    120510-200    200U
            環(huán)狀 DNA 全基因組擴(kuò)增試劑盒    100947-30    30 次
            10mL    微量核酸沉淀劑    
            1g    Hemoglobin(NO 清除劑 )    
            5g    D(+) 木糖    
            250 mL    Zamboni 固定液    
            維生素 B1    CAS59-43-8    10g
            成骨細(xì)胞生長(zhǎng)因子    21-0010-5     5mL  

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