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            上海谷研實業(yè)有限公司
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            大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細胞;BOS-5說明書

            參  考  價面議
            具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)

            產(chǎn)品型號

            品       牌ATCC

            廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

            所  在  地上海市

            更新時間:2017-01-23 14:30:02瀏覽次數(shù):320次

            聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)
            大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細胞;BOS-5說明書售后:收到細胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運輸?shù)仍颍r,應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報告并及時傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

            大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細胞;BOS-5說明書【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。

            細胞名稱 大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細胞;BOS-5說明書
            形態(tài)特性  成纖維細胞樣
            生長特性 貼壁生長
            特征特性  該細胞系來源于一雌性大額牛與婆羅門牛雜交F1代的耳部皮膚組織,2010年由中科院昆明細胞庫建立。 
            培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
            傳代方法  1:2傳代;3-4天一次
            傳代情況 P2
            凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
            支原體檢測 熒光法(-)
            STR  -
            同工酶 
            染色體 
            使用權(quán)限 B類

            細胞培養(yǎng)步驟:
            一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
            1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
            2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
            3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
            二、細胞處理:
            1、復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度。
            2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
            對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
            1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
            2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
            3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
            4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
            對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
            方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
            方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
            3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應(yīng)將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
            質(zhì)量保證:    
            我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
            操作步驟:
            1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
            2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

            F9(小鼠畸胎瘤細胞)    5×106cells/瓶×2            
            GoldCassette-TRX/TRX重組標(biāo)簽蛋白快速檢測試劑盒(精裝)    2次        2次、10次    
            小鼠胰腺上細胞*培養(yǎng)基    100mL            
            BRL(大鼠肝細胞)    5×106cells/瓶×2            
            小鼠肺細胞    英文名稱:        Lewis    
            Cell Counting Kit-8 (CCK-8試劑盒)    規(guī)格:        100次    
            人小氣道平滑肌細胞*培養(yǎng)基    100mL            
            Korser氏肉湯發(fā)酵管    BR    國產(chǎn)/進口    20支    
            人腦血管平滑肌細胞                
            標(biāo)準(zhǔn)平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基/SPCA    用于細菌總數(shù)的計數(shù)    國產(chǎn)/進口    250克    
            人成纖維瘤細胞    英文名稱:        HT1080    
            聚山梨酯80培養(yǎng)基(需氧、厭氧菌)/Tween80 Medium(Bacteria)    油劑藥品的無菌試驗    國產(chǎn)/進口    250克    
            大鼠胃粘膜上細胞*培養(yǎng)基    100mL            
            青霉素敏感紙片    炭疽桿菌檢測用配套試劑    國產(chǎn)/進口    20片    
            Y1(Y-1) (小鼠腎上腺質(zhì)細胞)    5×106cells/瓶×2            
            耶爾森氏菌顯色培養(yǎng)基        國產(chǎn)/進口    250克    
            SF-295(人XG惡性膠質(zhì)瘤細胞)    5×106cells/瓶×2            
            MS751(人子宮頸表細胞)    5×106cells/瓶×2  
            DNA  Tween 20    131024-100    100mL
            250mg    噻唑蘭    
            50 次    DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (3)φX174 DNA/Hinc Ⅱ    
            50 次    柱式糞便 DNAout    
            1mL    XL1-Blue 種    
            Klenow 片段 (3´ → 5´ exo-)    131235-200    200U
            柱式 OLIGO 回收試劑盒    80401-50    50 次
            1g    羧芐青    
            30 次    單細胞全基因組擴增試劑盒    
            30 次    一站式蛋白質(zhì)非變性 PAGE 套裝 ( 中 pH)    
            1000μL    組蛋白 3.1 小鼠單抗    
            核酸外切酶 T    130627-250    250U
            海藻糖溶液,1.5M,PCR     130506-1.5    1.5mL
            30mL    天凈沙核酸濃縮劑    
            1mL    EGY48 酵母種    
            100mL    一管式 TMB 顯色液 A( 可溶型 )     
            24 次    凋亡 DNAout    
            N- 乙酰 -L- 半胱氨酸    CAS616-91-1    5g
            兩棲類和爬行類動物種屬鑒定 PCR Mix    131128I-100    100 次
            2000U    XhoI              

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