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            上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
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            VERO細(xì)胞衍生株;SVP說明書

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            具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)

            產(chǎn)品型號

            品       牌ATCC

            廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

            所  在  地上海市

            更新時間:2017-01-23 14:49:11瀏覽次數(shù):289次

            聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)
            VERO細(xì)胞衍生株;SVP說明書售后:收到細(xì)胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r,應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報告并及時傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

            VERO細(xì)胞衍生株;SVP說明書【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。

            細(xì)胞名稱 VERO細(xì)胞衍生株;SVP說明書
            形態(tài)特性  成纖維細(xì)胞樣
            生長特性 貼壁生長
            特征特性  SVP細(xì)胞是Vero細(xì)胞系的衍生株。除具有Vero細(xì)胞的生物學(xué)特性外,還表現(xiàn)為對多種人類病毒,動物病毒的敏感性。常用作病毒宿主研究病毒的致病機(jī)制,抗病毒物等。 
            培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
            傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
            傳代情況 C112
            凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
            支原體檢測 陰性
            STR 
            同工酶 同工酶鑒定
            染色體 
            使用權(quán)限 A類

            細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
            一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
            1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
            2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
            3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
            二、細(xì)胞處理:
            1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
            2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
            對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
            1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
            2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
            3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
            4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
            對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
            方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
            方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
            3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
            質(zhì)量保證:    
            我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
            操作步驟:
            1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
            2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

            多枝鐮孢
            蘇云金芽胞桿菌達(dá)姆斯塔特亞種 Bacillus thuringiensis subsp. darmstadiensis
            HL-60(人早幼粒急性白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
            酸球菌 Lactococcus lactis
            苜蓿中華根瘤菌
            SH-SY5Y(人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
            戊糖片球菌 Pediococcus pentosaceus
            毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes
            發(fā)根土壤桿菌 Agrobacterium rhizogenes
            769-P(人腎細(xì)胞腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
            挪威假絲酵母 Candida norvegensis
            根瘤菌 Rhizobium sp.
            PANC-1全細(xì)胞裂解液100ug100uggersion
            赭曲霉 Aspergillus ochraceus
            雙孢蘑菇 Agaricus bisporus
            胰凝蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)10mL
            小鼠腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
            植物桿菌 Lactobacillus plantarum
            費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii
            mRTEC, 小鼠腎小管上皮細(xì)胞gersion
            少根根霉 Rhizopus arrhizus
            香栓菌 Trametes suaveloens
            小鼠淋巴成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
            胎兒表皮角化細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
            口津假絲酵母 Candida melibiosica葡聚糖 T-500    CAS9004-54-0    10g
            Rosetta-gami(DE3) 種    12-107    1mL
            100 次    液相內(nèi)毒素清除劑    
            1mL    JM109 種    
            1g    芥子酸    
            1g    pNPP 干粉    
            氫化可    CAS50-23-7    5g
            壯觀溶液 ,50mg/mL    131232-10    10mL
            1g    吲哚 -3- 丁酸    
            250g    聚乙二醇 4000    
            100g    水解乳蛋白    
            1mL    小牛胸 DNA 溶液    
            聚乙二醇 8000    CAS25322-68-3    250g
            福林酚試劑    100939-100    100mL
            1mg    重組蛋白 A    
            10 塊    LB 平板培養(yǎng)基 無抗    
            100mg    纖維蛋白原    
            50 次    雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V- 熒光素 488·PI)     
            蘇丹Ⅲ    CAS85-86-9    5g
            蛋白膠微量回收試劑盒    90402-50    50 次
            10g    α- 氰基 -4- 羥基肉桂酸    
            10g    氯化銫    
            10U    磷酸二酯酶Ⅱ    
            24 T    肌酸激酶測試劑盒    

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