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            上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
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            非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A價(jià)格

            參  考  價(jià)面議
            具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

            產(chǎn)品型號

            品       牌ATCC

            廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

            所  在  地上海市

            更新時(shí)間:2017-01-23 14:58:09瀏覽次數(shù):370次

            聯(lián)系我時(shí),請告知來自 化工儀器網(wǎng)
            非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A價(jià)格售后:收到細(xì)胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

            非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A價(jià)格質(zhì)量保證:    
            我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。

            非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A價(jià)格操作步驟:

            1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
            2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

            【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療
            細(xì)胞名稱
            形態(tài)特性  上皮樣細(xì)胞
            生長特性 貼壁生長
            特征特性  Vero-HCV-NS5A細(xì)胞整合有丙型肝炎病毒的NS5A基因,能穩(wěn)定表達(dá)NS5A蛋白,是HCV基礎(chǔ)研究的*摸型。它由武漢大學(xué)病毒學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室郭佳博士于2008年構(gòu)建并保存。 
            培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
            傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
            傳代情況 C35
            凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
            支原體檢測 陰性
            STR 
            同工酶 同工酶鑒定
            染色體 
            使用權(quán)限 A類

            細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
            一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
            1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
            2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
            3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
            二、細(xì)胞處理:
            1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
            2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
            對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
            1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
            2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
            3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
            4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
            對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
            方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
            方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
            3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

            曲霉屬 Aspergillus sp.
            地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis
            大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
            DLD-1(人結(jié)腸腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
            植物桿菌 Lactobacillus plantarum
            莢膜放線桿菌 Actinobacillus capsulatus
            EDTA Buffer(50x)/EDTA 緩沖液(IHC抗原修復(fù)液, 50x)100ml國產(chǎn)
            釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
            燼灰吸水鏈霉菌 Streptomyces cinereohygroscopicus
            倉鼠腎成纖維細(xì)胞英文名稱:BHK-21 [C-13]
            宇佐美曲霉變種 Aspergillus usamii var.
            側(cè)耳 Pleurotus sp.
            細(xì)胞周期與細(xì)胞凋亡檢測試劑盒規(guī)格:50次
            293T, SV40轉(zhuǎn)化的人胚腎上皮細(xì)胞系
            煙曲霉 Aspergillus fumigatus
            大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
            LLC-MK2(恒河猴腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
            泡盛曲霉 Aspergillus awamori
            梭形芽胞桿菌 Bacillus fusiformis
            HCG803全細(xì)胞裂解液100ug100ug
            釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae0.5mLDNA 離心超濾管 (300-500 KD)    120668E-1    1個(gè)
            25mL    四甲基乙二胺    
            5次    大提柱式動物 RNAout    
            100g    瓊脂糖    
            500U    堿性磷酸酶,偶聯(lián)    
            PvuII    17-0190    1000U
            暗盒 (5×7 英寸 )    120609A-1    1個(gè)
            5g    苔素    
            1g    多聚半乳糖醛    
            25 次    動物細(xì)胞核蛋白微量制備試劑盒    
            200U    Dicer(RNase III)    
            Western 雜交技術(shù)服務(wù)    P002-1    1 張膜
            UTP 溶液,2.5mM    131217-2    2mL
            2mL    無包被磁珠    
            1mL    GS115 酵母種    
            25mg    可溶性兩性 B    
            2mL    dGTP 溶液,2.5mM    
            纖維二糖    CAS528-50-7    5g
            Rosetta 感受態(tài)細(xì)胞    140379-10    10×100μL
            200mL    小鼠中性粒細(xì)胞分離液 1.100    
            100 次    海腎熒光素酶報(bào)告基因檢測試劑盒    

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