高背鯽魚尾鰭細胞；GBJd說明書【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

細胞名稱 高背鯽魚尾鰭細胞；GBJd說明書
形態(tài)特性  成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細胞系來源于一高背鯽魚（滇池）的尾鰭組織。1985年由中國科學(xué)院昆明細胞庫建立。 
培養(yǎng)條件  M-199: with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS)   15%NBS
傳代方法  1：2傳代；7-10天一次
傳代情況 P8
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法（-）
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應(yīng)將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

馬克斯克魯維酵母 Kluyceromyces marxianus
Hepa 1-6(小鼠肝細胞)5×106cells/瓶×2
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
純白鏈霉菌 Streptomyces candidus
大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細胞*培養(yǎng)基100mL
酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp.lactis
蘋果黑腐皮殼
小鼠畸胎瘤細胞英文名稱：Pcc4
人氣管平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL
嗜酸桿菌 Lactobacillus acidophilus
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
TSCCa(人舌鱗細胞)5×106cells/瓶×2
糖丁酸梭菌 Clostridium saccharobutyricum
中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii
IV型膠原酶(含10mL酶解緩沖液)1mL
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
小小鏈霉菌 Streptomyces parvullus
丹參酮IIA規(guī)格：1g/支；98%
熱帶假絲酵母 Candida tropicalis
毛木耳 Auricularia polytricha4,4'-Diamino-2,2'-stilbenedisulfonic acid    4,4'-二氨基二乙-2,2'-二磺酸    1981/11/8
N-(2,4-DINITROPHENYL)-L-ALANINE    N-(2,4-二基)-L-丙氨酸    1655-52-3
Tetramethyl-1,3-diaminopropane    四基丙    110-95-2
dibutyl 2,2'-thiobisacetate    硫代二甘酸二正丁酯    4121/12/4
2-Octanone    仲    111-13-7
(S)-N-Boc-(4-Pyridyl)alanine    Boc-3-(4-吡啶基)-L-丙氨酸    37535-57-2
6-Aminoindazole    6-氨基吲唑    6967-12-0
GALLIUM(III) TRIFLUOROMETHANESULFONATE    三磺鎵    74974-60-0
Methyl 4-chloro-3-oxo-butanoate    4-乙酰乙酸酯    32807-28-6
Sanggenon C    桑根C    80651-76-9
4-Chloro-7-nitrobenzo-2-oxa-1,3-diazole    4--7-基-2,1,3-并氧雜惡二唑    10199-89-0
1,1'-Thiobisethane    乙硫    352-93-2
3-Ethynylthiophene    3-乙炔噻吩    67237-53-0
Calcium carbide    碳化鈣    75-20-7
Glycitin    黃豆黃苷    40246-10-4
cis-3-Hexenyl formate    酸葉醇酯    33467-73-1
Phenol    酚    108-95-2
1,4-Dibromobutane    1,4-二溴丁烷    110-52-1