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            上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
            中級(jí)會(huì)員 | 第10年

            15026555973

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            子宮內(nèi)膜干細(xì)胞

            參  考  價(jià)面議
            具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

            產(chǎn)品型號(hào)

            品       牌R&D/美國(guó)

            廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

            所  在  地上海市

            更新時(shí)間:2022-04-13 14:13:42瀏覽次數(shù):183次

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            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
            貨號(hào) GOY-01X1346 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
            主要用途 僅供科研使用
            子宮內(nèi)膜干細(xì)胞公司其它各種產(chǎn)品人抗血小板抗體是一種IgG(PA-IgG/M/A)elisa檢測(cè)試劑盒
            人抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體(cANCA)elisa檢測(cè)試劑盒
            人可溶性E選擇素(sE-selectin)elisa檢測(cè)試劑盒
            人可溶性P選擇素(sP-Selectin)elisa檢測(cè)試劑盒
            人可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)elisa檢測(cè)試劑盒

            培養(yǎng)操作:
            1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37水浴中迅速搖晃解凍,加 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?/span> 細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
            2
            )細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
            1.
            棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
            2.
            1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
            3.
            6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
            4.
            將細(xì)胞懸液按 12 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
            3
            )細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
            1.
            細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
            2. 4 min 1000rpm
            離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
            3.
            將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

            圖片13.jpg

            產(chǎn)品屬性:

            產(chǎn)品名稱

            子宮內(nèi)膜干細(xì)胞

            規(guī)格

            5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

            貨號(hào)

            GOY-01X1346

            名稱    子宮內(nèi)膜干細(xì)胞
            2.組織來(lái)源:子宮組織

            3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

            4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

            子宮內(nèi)膜干細(xì)胞細(xì)胞分離自子宮組織;子宮是孕育胎兒的器官,位于盆腔中部,膀胱與直腸之間,其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶、盆膈、尿生殖膈及會(huì)陰中心腱等結(jié)構(gòu)維持,這些結(jié)構(gòu)受損或松弛時(shí),可以引起子宮脫垂。子宮內(nèi)膜即黏膜,由上皮(屬單層柱狀上皮,有分泌細(xì)胞和纖毛細(xì)胞二種)和固有膜(由結(jié)締組織構(gòu)成,其內(nèi)有大量的星形細(xì)胞,稱為基質(zhì)細(xì)胞)組成,子宮內(nèi)膜可分為淺表的功能膜和深部的基底層,功能層較厚,約占內(nèi)膜厚度的4/5;基底層較薄較致密,約占1/5,功能層可剝脫,而基底層不可剝脫。子宮內(nèi)膜構(gòu)成雌性哺乳動(dòng)物子宮壁的內(nèi)層,位于子宮腔面,在動(dòng)物生殖生理活動(dòng)中占有重要地位。子宮和子宮內(nèi)膜是維持雌性動(dòng)物生理功能和生育能力的重要器官,子宮內(nèi)膜的再生修復(fù)是子宮的重要生理功能。間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSCs)來(lái)源于胚胎時(shí)期的中胚層組織,具有很強(qiáng)的自我復(fù)制和多向分化潛能,具有向脂肪細(xì)胞、成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞及肌細(xì)胞等多種終末細(xì)胞定向分化的能力,運(yùn)用 MSCs來(lái)修復(fù)軟骨損傷具有很好的應(yīng)用前景,目前已能夠從骨髓、脂肪、滑膜、骨骼、肌肉等組織以及羊水、臍帶、臍帶血中分離和制備間充質(zhì)干細(xì)胞。體外培養(yǎng)的子宮內(nèi)膜干細(xì)胞細(xì)胞對(duì)于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

            5.方法簡(jiǎn)介:

            公司實(shí)驗(yàn)室分離的人子宮內(nèi)膜干細(xì)胞采用膠原酶消化法、低密度稀釋克隆制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

            6.質(zhì)量檢測(cè):

            公司實(shí)驗(yàn)室分離的人子宮內(nèi)膜干細(xì)胞經(jīng)CD90免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

            7.培養(yǎng)信息:

            培養(yǎng)基 FBS、生長(zhǎng)添加劑、PenicillinStreptomycin

            換液頻率 2-3天換液一次

            生長(zhǎng)特性 貼壁

            細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

            傳代特性 可傳3代左右

            消化液 0.25%

            培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%CO2,5%

            實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
            產(chǎn)品僅用于科研一、分離與培養(yǎng):
            1
            、無(wú)菌條件下,取出1-3d SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,后將成1mm3左右大??;
            2
            、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4放置;
            3
            、剩下的組織再加入34mL酶消化液,混懸10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
            4
            、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10 FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37 ,5CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
            5
            、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
            二、免疫熒光鑒定:
            1
            、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
            2
            、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4條件下,用0.1Triton X-100透膜15min;
            3
            、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min
            4
            、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
            5
            、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37條件下放置1h;
            6
            、用PBS沖洗3次,每次10min,后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
            糖蛋白染色試劑盒10   Rapamycin(FRAP/mTOR 抑制劑 )100μg

            0酸蛋白染色試劑盒10   Quin-2AM1mg

            標(biāo)簽蛋白染色試劑盒10   PMSF 溶液,10mg/mL5mL

            Bradford 法蛋白定量試劑盒100mL  PMA/TPA (PKC 激活劑 )1mg

            Bradford 法蛋白定量試劑盒200mL  Pifithrin-a(p53 抑制劑 )5mg
            Ca2+激活K+通道蛋白2(KCNN2)elisa檢測(cè)試劑盒

            C4結(jié)合蛋白(C4BP)elisa檢測(cè)試劑盒

            C1q/TNF相關(guān)蛋白3(Cartonectin/CTRP3/CORS-26)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)

            B因子(BF)elisa檢測(cè)試劑盒

            B細(xì)胞受體相關(guān)蛋白31(BCAP31)elisa檢測(cè)試劑盒
            子宮內(nèi)膜干細(xì)胞小鼠白介素12A(IL12A)elisa檢測(cè)試劑盒

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            冷凍保存細(xì)胞之方法?
            冷凍保存方法一: 冷凍管置于4 30~60 分鐘-20 30 分鐘* → -80 16~18 小時(shí)(或隔夜)液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
            冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。


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