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            上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
            中級(jí)會(huì)員 | 第10年

            15026555973

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            大鼠臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞

            參  考  價(jià)面議
            具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

            產(chǎn)品型號(hào)

            品       牌R&D/美國

            廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

            所  在  地上海市

            更新時(shí)間:2022-04-13 14:19:39瀏覽次數(shù):123次

            聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 化工儀器網(wǎng)
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            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
            貨號(hào) GOY-01X1353 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
            主要用途 僅供科研使用
            大鼠臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞公司其它各種產(chǎn)品人趨化因子(CCL5/RANTES)elisa檢測(cè)試劑盒
            人趨化因子CXCL16(CXCL16)elisa檢測(cè)試劑盒
            人(NE)elisa檢測(cè)試劑盒
            人醛固酮(ALD)elisa檢測(cè)試劑盒
            人缺氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)elisa檢測(cè)試劑盒

            冷凍保存細(xì)胞之方法?
            冷凍保存方法一: 冷凍管置于4 30~60 分鐘-20 30 分鐘* → -80 16~18 小時(shí)(或隔夜)液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
            冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

            圖片13.jpg

            產(chǎn)品屬性:

            產(chǎn)品名稱

            大鼠臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞

            規(guī)格

            5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

            貨號(hào)

            GOY-01X1353

            名稱    大鼠臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞
            2.組織來源:臍帶組織

            3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

            4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

            大鼠臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞分離自臍帶組織;它是臍靜脈的重要結(jié)構(gòu)組成細(xì)胞之一,在機(jī)體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用。臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結(jié)構(gòu),臍帶中通過尿膜的血管即臍動(dòng)脈和臍靜脈,卵黃囊的血管即臍腸系膜動(dòng)脈及臍腸系膜靜脈。在子宮中,子宮動(dòng)脈在胎盤的母體部分出的毛細(xì)血管,與胎盤的子體部胎兒毛細(xì)血管靠近,在此處母體和胎兒的血液間進(jìn)行CO2O2,代謝產(chǎn)物即代謝廢物和營養(yǎng)物質(zhì)的交換。臍動(dòng)脈將胎兒產(chǎn)生的廢物運(yùn)送至胎盤,臍靜脈將O2和營養(yǎng)物質(zhì)從胎盤運(yùn)送給胎兒。

            5.方法簡(jiǎn)介:

            公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠下腔靜脈內(nèi)皮細(xì)胞采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

            6.質(zhì)量檢測(cè):

            公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

            7.培養(yǎng)信息:

            包被條件 PLL0.1mg/ml),明膠(0.1%

            培養(yǎng)基 FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin

            換液頻率 2-3天換液一次

            生長(zhǎng)特性 貼壁

            細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣

            傳代特性 可傳3代左右

            消化液 0.25%

            培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%CO2,5%

            培養(yǎng)操作:
            1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37水浴中迅速搖晃解凍,加 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?/span> 細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
            2
            )細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
            1.
            棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
            2.
            1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
            3.
            6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
            4.
            將細(xì)胞懸液按 12 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
            3
            )細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
            1.
            細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
            2. 4 min 1000rpm
            離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
            3.
            將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
            天凈沙 SPIA 擴(kuò)增試劑盒 ( 用于擴(kuò)增 DNA 模板 )20   電泳級(jí)甘油100mL

            T7 體外轉(zhuǎn)錄試劑盒50   電泳級(jí)二甲苯藍(lán) FF 溶液,1%10mL

            SP6 體外轉(zhuǎn)錄試劑盒50   電泳級(jí)橙黃 G 溶液10mL

            T3 體外轉(zhuǎn)錄試劑盒50   電泳級(jí)丙溶液 ( 干粉型 )200mL

            m7G(5)ppp(5)G 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD  電泳級(jí) TEMED1.5mL
            CD5分子(CD5)elisa分析檢測(cè)試劑盒

            CD4分子(CD4)elisa分析檢測(cè)試劑盒

            CD45分子(CD45)elisa分析檢測(cè)試劑盒

            CD44分子(CD44)elisa分析檢測(cè)試劑盒

            CD44變體6(CD44-v6)elisa分析檢測(cè)試劑盒
            大鼠臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞小鼠白介素1受體拮抗劑(IL-1RA)elisa檢測(cè)試劑盒

            小鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra/CD121)elisa分析檢測(cè)試劑盒

            小鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra/CD121)elisa檢測(cè)試劑盒

            小鼠白介素1受體相關(guān)激酶1(IRAK1)elisa分析檢測(cè)試劑盒

            小鼠白介素1受體相關(guān)激酶1(IRAK1)elisa檢測(cè)試劑盒
            實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
            產(chǎn)品僅用于科研一、分離與培養(yǎng):
            1
            、無菌條件下,取出1-3d SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,后將成1mm3左右大??;
            2
            、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4放置;
            3
            、剩下的組織再加入34mL酶消化液,混懸10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
            4
            、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10 FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37 5CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
            5
            、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
            二、免疫熒光鑒定:
            1
            、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
            2
            、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4條件下,用0.1Triton X-100透膜15min;
            3
            、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
            4
            、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
            5
            、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37條件下放置1h
            6
            、用PBS沖洗3次,每次10min,后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。


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