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            上海谷研實業(yè)有限公司
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            當前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>科研細胞>>原代細胞>> 鼻黏膜成纖維細胞

            鼻黏膜成纖維細胞

            參  考  價面議
            具體成交價以合同協(xié)議為準

            產(chǎn)品型號

            品       牌R&D/美國

            廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

            所  在  地上海市

            更新時間:2022-04-13 14:02:37瀏覽次數(shù):152次

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            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
            貨號 GOY-01X1337 應用領(lǐng)域 化工
            主要用途 僅供科研使用
            鼻黏膜成纖維細胞公司其它各種產(chǎn)品人蛋白激酶(PTK)elisa檢測試劑盒
            人抵抗素(RETN)elisa檢測試劑盒
            人凋亡活化因子1(APAF-1)elisa檢測試劑盒
            人凋亡相關(guān)因子(Fas)elisa檢測試劑盒
            人端粒酶(TE)elisa檢測試劑盒

            產(chǎn)品屬性:

            產(chǎn)品名稱

            鼻黏膜成纖維細胞

            規(guī)格

            5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

            貨號

            GOY-01X1337

            名稱    鼻黏膜成纖維細胞
            2.組織來源:鼻粘膜組織

            3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

            4.細胞簡介:

            鼻黏膜成纖維細胞分離自鼻黏膜組織;黏膜是覆蓋在人體內(nèi)消化、呼吸、泌尿、生殖等器官管腔內(nèi)壁的一層組織結(jié)構(gòu),由上皮組織和疏松結(jié)締組織構(gòu)成。根據(jù)部位不同,有口腔黏膜、胃腸黏膜、鼻腔黏膜、氣管黏膜、陰道黏膜、眼瞼黏膜等不同名稱。它們的結(jié)構(gòu)也因功能、部位不一而不盡相同。鼻腔黏膜,簡稱鼻黏膜,覆蓋于鼻腔表面,黏膜下方為軟骨、骨或骨骼肌。成纖維細胞是結(jié)締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細胞基本貼壁*,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質(zhì)透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

            5.方法簡介:

            公司實驗室分離的人鼻黏膜成纖維細胞采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過成纖維細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶。

            6.質(zhì)量檢測:

            公司實驗室分離的人鼻黏膜成纖維細胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

            7.培養(yǎng)信息:

            培養(yǎng)基 FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

            換液頻率 2-3天換液一次

            生長特性 貼壁

            細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

            傳代特性 可傳3-5代左右

            消化液 0.25%

            培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

            圖片13.jpg

            冷凍保存細胞之方法?
            冷凍保存方法一: 冷凍管置于4 30~60 分鐘-20 30 分鐘* → -80 16~18 小時(或隔夜)液氮槽vaporphase 長期儲存。
            冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
            培養(yǎng)操作:
            1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37水浴中迅速搖晃解凍,加 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?/span> 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
            2
            )細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
            1.
            棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
            2.
            1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
            3.
            6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
            4.
            將細胞懸液按 12 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
            3
            )細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
            1.
            細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
            2. 4 min 1000rpm
            離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
            3.
            將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
            實驗報告:
            產(chǎn)品僅用于科研一、分離與培養(yǎng):
            1
            、無菌條件下,取出1-3d SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,后將成1mm3左右大小;
            2
            、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4放置;
            3
            、剩下的組織再加入34mL酶消化液,混懸10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
            4
            、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10 FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37 ,5CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
            5
            、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
            二、免疫熒光鑒定:
            1
            、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min
            2
            、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4條件下,用0.1Triton X-100透膜15min;
            3
            PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
            4
            、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4冰箱中孵育細胞過夜;
            5
            、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37條件下放置1h;
            6
            、用PBS沖洗3次,每次10min,后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
            羧肽酶CPN2抗體

            /鈣調(diào)素依賴蛋白激酶2D(CaMKIIδ)

            電壓依賴性鈣通道Cav1.1抗體

            衰老相關(guān)蛋白5抗體

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