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            上海谷研實業(yè)有限公司
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            15026555973

            當前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>科研細胞>>原代細胞>> 小鼠脂肪干細胞

            小鼠脂肪干細胞

            參  考  價面議
            具體成交價以合同協(xié)議為準

            產品型號

            品       牌R&D/美國

            廠商性質經銷商

            所  在  地上海市

            更新時間:2022-04-13 12:26:53瀏覽次數:242次

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            供貨周期 現貨 規(guī)格 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
            貨號 GOY-01X1282 應用領域 化工
            主要用途 僅供科研使用
            小鼠脂肪干細胞公司其它各種產品和磷酸酶抑制劑混合物250ul
            和磷酸酶抑制劑混合物1ml
            和磷酸酶抑制劑混合物(含EDTA)250ul
            抑制劑混合物片劑(EDTA Free)1片
            抑制劑混合物片劑(EDTA Free)20片

            產品屬性:

            產品名稱

            小鼠脂肪干細胞

            規(guī)格

            5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

            貨號

            GOY-01X1282

            名稱    小鼠脂肪干細胞
            2.組織來源:脂肪組織

            3.產品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

            4.細胞簡介:

            小鼠脂肪干細胞分離自脂肪組織;脂肪組織主要由大量群集的脂肪細胞構成,聚集成團的脂肪細胞由薄層疏松結締組織分隔成小葉;貯存的脂肪,在需要時可迅速分解成甘油和脂肪酸,經血液輸送到各組織以供利用。它們影響胰島素敏感性、血壓水平、內皮功能、纖溶活動及炎癥反應,參與多種重要病理生理過程;脂肪組織已由過去單純作為能量儲存的器官而成為一個極其重要的內分泌系統(tǒng)。脂肪干細胞(ADSCs)是一種具有多向分化潛能的干細胞,主要恢復組織細胞的修復功能,促進細胞的再生,恢復年輕面容的同時,身體機能也得到充分改善,有效改善亞健康、早衰等疾病,由內而外真正的有效抵抗衰老。脂肪干細胞具有很多優(yōu)點:①具有自我更新及多向分化的潛能;②來源充足;③對供區(qū)的創(chuàng)傷較?。虎塬@得率及體外擴增速率高。脂肪干細胞是目前被廣泛應用于組織工程領域中理想的種子細胞。

            5.方法簡介:

            公司實驗室分離的小鼠脂肪干細胞采用膠原酶消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

            6.質量檢測:

            公司實驗室分離的小鼠脂肪干細胞CD29、CD44免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

            7.培養(yǎng)信息:

            培養(yǎng)基 FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

            換液頻率 2-3天換液一次

            生長特性 貼壁

            細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

            傳代特性 可傳2-3

            消化液 0.25%

            培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO25%

            圖片13.jpg

            冷凍保存細胞之方法?
            冷凍保存方法一: 冷凍管置于4 30~60 分鐘-20 30 分鐘* → -80 16~18 小時(或隔夜)液氮槽vaporphase 長期儲存。
            冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
            培養(yǎng)操作:
            1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37水浴中迅速搖晃解凍,加 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
            2
            )細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
            1.
            棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
            2.
            1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
            3.
            6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
            4.
            將細胞懸液按 12 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
            3
            )細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
            1.
            細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細胞變圓 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數板計數。
            2. 4 min 1000rpm
            離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
            3.
            將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
            實驗報告:
            產品僅用于科研一、分離與培養(yǎng):
            1
            、無菌條件下,取出1-3d SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,后將成1mm3左右大?。?/span>
            2
            、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4放置;
            3
            、剩下的組織再加入34mL酶消化液,混懸10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
            4
            、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10 FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37 ,5CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
            5
            、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
            二、免疫熒光鑒定:
            1
            、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
            2
            PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4條件下,用0.1Triton X-100透膜15min
            3
            、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
            4
            、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4冰箱中孵育細胞過夜;
            5
            、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37條件下放置1h;
            6
            、用PBS沖洗3次,每次10min,后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
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