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            上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
            中級(jí)會(huì)員 | 第10年

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            小鼠糖皮質(zhì)類(lèi)固醇受體(GR)elisa試劑盒操作步驟

            參  考  價(jià)面議
            具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

            產(chǎn)品型號(hào)

            品       牌R&D/美國(guó)

            廠(chǎng)商性質(zhì)經(jīng)銷(xiāo)商

            所  在  地上海市

            更新時(shí)間:2017-03-15 12:49:45瀏覽次數(shù):199次

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            用途:本試劑盒僅供科研使用,定量檢測(cè)細(xì)胞液、體液、組織、血清、血漿等標(biāo)本小鼠糖皮質(zhì)類(lèi)固醇受體(GR)elisa試劑盒操作步驟含量。

            小鼠糖皮質(zhì)類(lèi)固醇受體(GR)elisa試劑盒操作步驟     英文名稱(chēng):Mouse glucocorticoid receptor,GR ELISA Kit      檢測(cè)方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便。凡購(gòu)買(mǎi)本公司試劑盒非人為質(zhì)量問(wèn)題,收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換。 
            英文名稱(chēng):Mouse glucocorticoid receptor,GR ELISA Kit 
            規(guī)格:96T/48T
            主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
            性狀:盒裝液體
            人白介素2受體(IL-2R)Elisa測(cè)定試劑盒用途:科研與實(shí)驗(yàn)試劑,不得用于臨床診斷。
            標(biāo)本:血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
            種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚(yú)等。
            小鼠糖皮質(zhì)類(lèi)固醇受體(GR)elisa試劑盒操作步驟實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制:
            1. 儀器與材料:酶標(biāo)儀(使用前預(yù)熱30分鐘),微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水,濾紙。
            2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,如果樣品量不夠或者不確定,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻,靜置1小時(shí)備用(如果標(biāo)本是血清或者血漿,此步驟忽略)。
            3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用。
            小鼠糖皮質(zhì)類(lèi)固醇受體(GR)elisa試劑盒操作步驟樣品收集、處理及保存
            1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無(wú)菌管收集細(xì)胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
            2. 細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104 -106 /ml 左右,通過(guò)反復(fù)凍融,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,或 者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測(cè)。
            3. 血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測(cè)。
            4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上 清。
            5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
            6. 組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,稱(chēng)取重量0.5mg,加入500ul PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進(jìn)行檢測(cè)。
            7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
            8. 保存:如果樣品不能立即檢測(cè),應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標(biāo) 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
            小鼠糖皮質(zhì)類(lèi)固醇受體(GR)elisa試劑盒操作步驟操作步驟:
            1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘。
            2. 分組:取出 96 孔板,根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組(個(gè)濃度)、空白孔、待測(cè)樣品組。 注:為減少實(shí)驗(yàn)誤差,保證準(zhǔn)確性,建議設(shè)置復(fù)孔。
            3. 加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中;空白對(duì)照孔加入 50ul 的蒸餾水;其余微孔中加入 50ul 的待測(cè)樣本。
            4. 加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組、待測(cè)樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液(空白對(duì)照孔除外)。
            5. 溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時(shí)。
            6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿(mǎn)每孔,靜置 15-30s,充分清洗酶標(biāo)板 5 次,用吸水紙*拍干。
            7. 顯色:各孔加入顯色劑 A  50ul 后,再加入顯色劑 B  50ul。
            8. 終止:25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液。 9. 讀板:在 450nm 波長(zhǎng)讀取各孔的 OD 值。 
            注意事項(xiàng):
            1. 實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
            2. 加樣:加樣時(shí),要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔間的時(shí)間間隔過(guò)大,否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間,從而影響 實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。
            3. 孵育:嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。
            4. 反應(yīng)時(shí)間的控制:加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化,如果顏色較深,請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
            5. 建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高,應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋?zhuān)?jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
            6. 建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),試用幾個(gè)標(biāo)本),如果對(duì)本試劑盒有任何疑問(wèn),可和所購(gòu)經(jīng)銷(xiāo)商, 如果因運(yùn)輸過(guò)程導(dǎo)致試劑盒失效,可要求調(diào)換,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
            小鼠糖皮質(zhì)類(lèi)固醇受體(GR)elisa試劑盒操作步驟安全性
            1. 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。
            2. 實(shí)驗(yàn)中不要進(jìn)食、抽煙或使用化妝品。
            3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

            釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

            許旺酵母 Schwanniomyces occidentalis

            菜豆根瘤菌 Rhizobium phaseoli

            地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis

            人腎透細(xì)胞皮膚轉(zhuǎn)移細(xì)胞英文名稱(chēng):Caki

            大豆慢生根瘤菌

            Hs 578T(人腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

            費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii

            香菇 Lentinula edodes

            人肺大靜脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

            中性紅染色液(活細(xì)胞染色用)規(guī)格:100ml

            小鼠肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

            大鼠皮下脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

            意大利青霉 Penicillium italicum

            BT-474(人腺導(dǎo)管細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

            熱帶假絲酵母 Candida tropicalis

            成人表皮角化細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

            人絨毛間充質(zhì)成纖維細(xì)胞

            植物桿菌 Lactobacillus plantarum

            嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus

            香菇 Lentinula edodes

            酒假絲酵母 Candida kefyr 20-hydroxy Leukotriene B4 (50 ug)5S,12R,20-trihydroxy-6Z,8E,10E,14Z-eicosatetraenoic acid; 20-hydroxy LTB4; 20-hydroxy Leukotriene B4

            15(S)-HEPE (100 ug)15S-hydroxy-5Z,8Z,11Z,13E,17Z-eicosapentaenoic acid; 15(S)-HEPE

            8(S)-HETrE (100 ug)8S-hydroxy-9E,11Z,14Z-eicosatrienoic acid; 8(S)-HETrE

            Phosphate Buffer (250 dtn)Phosphate Buffer

            Prostaglandin Screening AChE Tracer (500 dtn)Prostaglandin Screening AChE Tracer

            COX Inhibitor Screening Assay Heme (1 ea)Heme; COX Inhibitor Screening Assay Heme

            Transcription Factor p53 Positive Control (1 ea)Transcription Factor p53 Positive Control

            Saline Sodium Phosphate EDTA Stock Solution (20X, pH 6。5) (250 mL)SSPE Buffer; Saline Sodium Phosphate EDTA Stock Solution (20X, pH 6。5)

            PAF C-18 (100 mg)1-O-octadecyl-2-O-acetyl-sn-glyceryl-3-phosphorylcholine; PAF C-18

            Sphingosine-1-Phosphate (5 mg)2S-ami-(dihydrogen phosphate)-4E-octadecene-1,3R-diol; S1P|Sphingosine-1-Phosphoric Acid; Sphingosine-1-Phosphate

            LSD1 Assay Peptide (1 ea)LSD1 Peptide|Lysine-Specific Demethylase 1 Assay Peptide; LSD1 Assay Peptide

            LSD Positive Control (100 uL)LSD Positive Control

            LY83583 (10 mg)6-(phenylamino)-5,8-quinolinedione; LY83583

            小鼠糖皮質(zhì)類(lèi)固醇受體(GR)elisa試劑盒操作步驟Aconitase Positive Control (1 ea)Aconitase Positive Control

            GW 9662 (50 mg)2-chloro-5-nitrobenzanilide; GW 9662

            HET0016 (10 mg)N-(4-butyl-2-methylphenyl)-N’-hydroxy-methanimidamide; N-hydroxy-N’-(4-n-butyl-2-methylphenyl)Formamidine; HET0016

            CDDO (5 mg)2-cyano-3,12-dioxo-oleana-1,9(11)-dien-28-oic acid; Bardoxolone|RTA 401; CDDO

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