蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱：醌NADH脫氫酶1(NQO1)重組蛋白小鼠

英文名稱：Recombinant NADH Dehydrogenase, Quinone 1 (NQO1)

DHQU; DIA4; DTD; NMOR1; NMORI; QR1; Azoreductase; DT-diaphorase; Menadione reductase; Phylloquinone reductase; Quinone reductase 1; NAD(P)H:quinone oxidoreductase 1

型號(hào)：GOY-01D13

酶與激酶

物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測(cè)分子量：34.5kDa

實(shí)際分子量：35kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Ala2~Lys274 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：100mM NaHCO3, 500mM NaCl緩沖液（pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點(diǎn)：8.8

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13)  產(chǎn)品名稱：基質(zhì)金屬13(MMP13)重組蛋白物種：Bos taurus; Bovine (Cattle，牛)

英文名稱：Recombinant Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13)  產(chǎn)品名稱：基質(zhì)金屬13(MMP13)重組蛋白物種：Canis familiaris; Canine (Dog，犬)

英文名稱：Recombinant Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13)  產(chǎn)品名稱：基質(zhì)金屬13(MMP13)重組蛋白物種：Capra hircus; Caprine (Goat，山羊)

英文名稱：Recombinant Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13)  產(chǎn)品名稱：基質(zhì)金屬13(MMP13)重組蛋白物種：Equus caballus; Equine (Horse，馬)

英文名稱：Recombinant Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13)  產(chǎn)品名稱：基質(zhì)金屬13(MMP13)重組蛋白物種：Chicken (Gallus，雞)

英文名稱：Recombinant Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13)  產(chǎn)品名稱：基質(zhì)金屬13(MMP13)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

膜粘連蛋白2受體抗體 AX2R

血管緊張素Ⅱ受體相關(guān)蛋白抗體 AGTRAP

血管緊張素1轉(zhuǎn)換酶抑制劑抗體 ACEI

拮抗凋亡轉(zhuǎn)錄因子抗體 AATF

α-1抗胰抗體 AACT-Alpha1

α-1抗胰抗體 alpha 1 Antitrypsin

ATP結(jié)合蛋白家族6抗體 ABCB6

三結(jié)合盒亞家族G1抗體 ABCG1

ANGEL1蛋白抗體 ANGEL1

ANGEL2蛋白抗體 ANGEL2

脂聯(lián)素受體2抗體 Adiponectin receptor 2

ANKLE2蛋白抗體 ANKLE2

醌NADH脫氫酶1(NQO1)重組蛋白小鼠桿菌屬 Lactobacillus sp.靈芝 Ganoderma lucidium

SF126(人腦瘤細(xì)胞)苜蓿中華根瘤菌

球孢白僵菌 Beauveria bassiana大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

皮氏假單胞菌 Pseudomonas pickettii大鼠神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基

假單胞菌 Pseudomonas sp.EL4(小鼠淋巴瘤細(xì)胞)

酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp.lactis瑞士桿菌 Lactobacillus helveticus

大腸桿菌 Escherichia coli無色透鏈霉菌 Streptomyces hyalinus

檸檬串珠菌 Leuconostoc citreum燼灰鏈霉菌 Micromonospora cinereogriseus

人腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基香菇 Lentinula edodes

糙皮側(cè)耳 Pleurotus ostreatus小白鼠肺成纖維樣細(xì)胞

SMMC-7221全細(xì)胞裂解液KLE(人子宮內(nèi)膜細(xì)胞)

燕麥鐮刀菌 Gibberella avenacea球型芽孢桿菌 Bacillus sphaerious

Jurkat全細(xì)胞裂解液鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus