蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻?hù)要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱(chēng)：類(lèi)固醇5α還原酶1(SRD5a1)重組蛋白大鼠

英文名稱(chēng)：Recombinant Steroid 5 Alpha Reductase 1 (SRD5a1)

3-Oxo-5 Alpha-Steroid Delta 4-Dehydrogenase Alpha 1

型號(hào)：GOY-01D19

酶與激酶

物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔

預(yù)測(cè)分子量：43.0kDa

實(shí)際分子量：45kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽：Val146~Leu259 with N-terminal His and GST Tag

緩沖液成份：PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：9.0

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱(chēng)：Recombinant Creatine Kinase, Muscle (CKM)  產(chǎn)品名稱(chēng)：肌肌酸激酶(CKM)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱(chēng)：Recombinant Creatine Kinase, Muscle (CKM)  產(chǎn)品名稱(chēng)：肌肌酸激酶(CKM)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱(chēng)：Recombinant Creatine Kinase, Muscle (CKM)  產(chǎn)品名稱(chēng)：肌肌酸激酶(CKM)重組蛋白物種：Sus scrofa; Porcine (Pig，豬)

英文名稱(chēng)：Recombinant Creatine Kinase, Muscle (CKM)  產(chǎn)品名稱(chēng)：肌肌酸激酶(CKM)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱(chēng)：Recombinant Creatine Kinase, Muscle (CKM)  產(chǎn)品名稱(chēng)：肌肌酸激酶(CKM)重組蛋白物種：Oryctolagus cuniculus (Rabbit，兔)

英文名稱(chēng)：Recombinant Ribonuclease T2 (RNASET2)  產(chǎn)品名稱(chēng)：核糖核酸酶T2(RNASET2)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體 AMPK alpha 2

雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗體（N端） ADAR1 (N-terminus)

腺苷酸激酶抗體 ADK

α2巨球蛋白樣蛋白1抗體 α2ML1 A2ML1

細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白3抗體 42097

肌動(dòng)蛋白α/α-SMA/α Actin抗體 Actin

ATP結(jié)合蛋白家族7抗體 ABCB7

ASCL2蛋白抗體 ASCL2

磷酸化活化轉(zhuǎn)錄因子1抗體 phospho-ATF1 (Ser63)

磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 phospho-ATF2 (Ser480)

磷酸化脊髓小腦失調(diào)癥蛋白1抗體 phospho-Ataxin 1(Ser775)

磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 phospho-ATF2 (Thr51 + Thr53)

類(lèi)固醇5α還原酶1(SRD5a1)重組蛋白大鼠IMR-32(人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)菜豆根瘤菌 Rhizobium phaseoli

小小鏈霉菌 Streptomyces parvullus金黃地鼠皮膚成纖維細(xì)胞

大鼠肝星形細(xì)胞培養(yǎng)基ACHN, 人腎細(xì)胞腺細(xì)胞

苜蓿中華根瘤菌Poly-D-lysine溶液

溝腸桿菌 Enterobacter cloacaeRaw264.7, 小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞

GoldCassette-GST/GST重組標(biāo)簽蛋白快速檢測(cè)試劑盒(裝)CCD-1095Sk(人腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管旁皮膚細(xì)胞)

費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp.lactis

小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

酒假絲酵母 Candida kefyrAnnexin V-FITC/PI雙染法細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒

人結(jié)直腸腺細(xì)胞粟酒裂殖酵母 Schizosaccharomyces pombe

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae人急性混合型白血病細(xì)胞

mEPC, 小鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞-骨髓BGC-803(人胃細(xì)胞)

小鼠肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基HUVEC-12, 人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞系