產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱：基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP13)重組蛋白大鼠

英文名稱：Recombinant Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13)

CLG3; Collagenase 3

型號(hào)：GOY-01D56

酶與激酶

腫瘤免疫

骨骼代謝

風(fēng)濕病學(xué)

物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：分泌, 細(xì)胞外基質(zhì)

預(yù)測(cè)分子量：18.8kDa

實(shí)際分子量：19/18kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Arg62~His217 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點(diǎn)：6.1

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant Alcohol Dehydrogenase 1 (ADH1)  產(chǎn)品名稱：乙醇脫氫酶1(ADH1)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Kallikrein 8 (KLK8)  產(chǎn)品名稱：激8(KLK8)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Kallikrein 6 (KLK6)  產(chǎn)品名稱：激6(KLK6)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Kallikrein 6 (KLK6)  產(chǎn)品名稱：激6(KLK6)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Dihydrolipoyl Transacetylase (DLAT)  產(chǎn)品名稱：二氫轉(zhuǎn)乙酰基酶(DLAT)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Kallikrein 10 (KLK10)  產(chǎn)品名稱：激10(KLK10)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

脂肪細(xì)胞源性氨基肽酶抗體（血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)蛋白） ARTS1

丁酰基合成酶3抗體 ACSM3

線粒體凋亡誘導(dǎo)因子2抗體 AIFM2

ABL2蛋白抗體 ABL2

血管緊張素轉(zhuǎn)換酶ACE1抗體 ACE

血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2抗體 ACE2

Acinus抗體 Acinus

醋酸激酶1抗體 Ack1

促腎上腺皮質(zhì)激素ACTH(18-39)抗體 ACTH (18-39)

促腎上腺皮質(zhì)激素ACTH (7-23)抗體 ACTH (7-23)

促腎上腺皮質(zhì)激素(1-39)抗體 ACTH (1-39)

活性依賴的神經(jīng)保護(hù)肽抗體 ADNP

基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP13)重組蛋白大鼠蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis中華鱉脾來源細(xì)胞

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiaeSH-SY5Y(人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)

皮狀絲孢酵母 Trichosporon cutaneum中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

根瘤菌Cell Counting Kit-8 (CCK-8試劑盒)

酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp.lactisRKO(人結(jié)腸腺細(xì)胞)

酒假絲酵母 Candida kefyrCT26.WT(小鼠結(jié)腸細(xì)胞)

光滑青霉釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

奇異鏈霉菌 Streptomyces mirabilisSK-N-BE(2) (人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)

嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus黑曲霉 Aspergillus niger

苦白蹄 Fomitopsis officinalis稻黃桿菌 Flovobacterium oryzae

人羊膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞人結(jié)腸細(xì)胞

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiaeBT-474(人腺導(dǎo)管細(xì)胞)

季也蒙假絲酵母 Candida guilliermondii人間充質(zhì)干細(xì)胞-肝