蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱：肌肌酸激酶(CKM)重組蛋白犬

英文名稱：Recombinant Creatine Kinase, Muscle (CKM)

CK-MM; CKMM; CK3; CK-M; MM-CK; M-CK; Creatine kinase M-type, N-terminally processed

型號(hào)：GOY-01D81

酶與激酶

心腦血管

物種：Canis familiaris; Canine (Dog，犬)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測(cè)分子量：41.7kDa

實(shí)際分子量：42kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽：Lys11~Leu367 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：6.7

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant Ornithine Decarboxylase (ODC)  產(chǎn)品名稱：脫羧酶(ODC)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Adenylate Cyclase 1, Brain (ADCY1)  產(chǎn)品名稱：腺苷酸環(huán)化酶1(ADCY1)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Adenylyl Cyclase Associated Protein 1 (CAP1)  產(chǎn)品名稱：腺苷酸環(huán)化酶關(guān)聯(lián)蛋白1(CAP1)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant 5-Lipoxygenase (5-LO)  產(chǎn)品名稱：花生四烯酸-5-脂加氧酶(5-LO)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant 5-Lipoxygenase (5-LO)  產(chǎn)品名稱：花生四烯酸-5-脂加氧酶(5-LO)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant 5-Lipoxygenase (5-LO)  產(chǎn)品名稱：花生四烯酸-5-脂加氧酶(5-LO)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

擬南芥ACA11抗體 ACA11

芳基酯酶A抗體 ARSA

AHA3抗體（擬南芥） AHA3

磷酸化鈉鉀ATP酶蛋白a1抗體 Phospho-ATP1A1 (Ser23)

磷酸化細(xì)胞凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1抗體 phospho-ASK1 (Ser83)

中性酯水解酶1抗體 AADACL1

人星形膠質(zhì)細(xì)胞抗體 Astrocyte

醛縮酶A抗體 Aldolase A

β淀粉樣肽（25-35）抗體 beta-Amyloid(25-35)

血管緊張素I抗體 Angiotensin I

膜粘連蛋白6抗體 Annexin VI

腎上腺髓質(zhì)素抗體(N端20肽) Adrenomedullin

肌肌酸激酶(CKM)重組蛋白犬釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae大鼠腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基

小鼠子宮頸上皮細(xì)胞培養(yǎng)基C3H/10T1/2, Clone 8(小鼠胚胎成纖維細(xì)胞)

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

2V6.11(人胚腎細(xì)胞)糖化酵母 Saccharomyces diastaticus

日本根霉產(chǎn)色鏈霉菌 Streptomyces chromogenes

II型膠原酶(含10mL酶解緩沖液)小鼠垂體瘤細(xì)胞

橄欖色鏈霉菌 Streptomyces olivaceusA9(小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞)

嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilusIV型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)

SK-NEP-1(人腎母細(xì)胞瘤細(xì)胞)大鼠肝竇內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae少酸鏈球菌 Streptococcus acidominimus

Cell Counting Kit-8 (CCK-8試劑盒)鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus

糖化酵母 Saccharomyces diastaticus海球菌 Marinococcus sp.

狗肺成纖維樣細(xì)胞NCI-H1688(人典型小細(xì)胞肺細(xì)胞)