產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱：前列腺酸性磷酸酶(PAP)重組蛋白人

英文名稱：Recombinant Prostatic Acid Phosphatase (PAP)

PSAP; ACPP; ACP3; PAPf39; 5'-NT; Prostatic Specific Acid Phosphatase; Ecto-5'-Nucleotidase

型號(hào)：GOY-01D107

酶與激酶

代謝通路

腫瘤免疫

骨骼代謝

物種：Homo sapiens (Human，人)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：細(xì)胞膜, 分泌, 溶酶體

預(yù)測(cè)分子量：20.6kDa

實(shí)際分子量：20kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽：Ser217~Asp386 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點(diǎn)：5.2

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant Angiotensin I Converting Enzyme 2 (ACE2)  產(chǎn)品名稱：血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Cyclin Dependent Kinase 1 (CDK1)  產(chǎn)品名稱：周期素依賴性激酶1(CDK1)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Cyclin Dependent Kinase 2 (CDK2)  產(chǎn)品名稱：周期素依賴性激酶2(CDK2)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Mannose Associated Serine Protease 1 (MASP1)  產(chǎn)品名稱：甘露聚糖結(jié)合凝集素關(guān)聯(lián)1(MASP1)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Mannose Associated Serine Protease 1 (MASP1)  產(chǎn)品名稱：甘露聚糖結(jié)合凝集素關(guān)聯(lián)1(MASP1)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Insulin Degrading Enzyme (IDE)  產(chǎn)品名稱：胰島素降解酶(IDE)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

β淀粉樣肽1-42抗體 beta-Amyloid (1-42)

Bcl-2結(jié)合抑凋亡蛋白2抗體 BAG2

磷酸化內(nèi)收蛋白抗體 phospho-beta Adducin (Ser713)

程序性死亡配體1抗體 CD274

程序性死亡配體1抗體 B7-H1/PD-L1/CD274

β淀粉樣肽（1-42）抗體 beta-Amyloid (1-42)

β淀粉樣肽（1-42）單克隆抗體 beta-Amyloid (1-42)

膽汁酸鹽輸出泵/ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白11抗體 ABCB11

BAIAP2L2蛋白抗體 BAIAP2L2

磷酸化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體 Phospho-Bad (Ser136)

BSPRY蛋白抗體 BSPRY

磷酸化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體 Phospho-Bad (Ser155)

前列腺酸性磷酸酶(PAP)重組蛋白人褐色小單孢菌 Micromonospora fusca毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes

小鼠腸上皮細(xì)胞培養(yǎng)基豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

293T(人胚腎細(xì)胞)AR42J(大鼠胰腺外分泌細(xì)胞)

植物桿菌 Lactobacillus Plantarum蘇云金芽孢桿菌庫(kù)爾斯塔克亞種 Bacillus thuringiensis subsp. Kurstaki

紅曲霉 Monascus anka蘇木

嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilusJ774A.1(小鼠單核巨噬細(xì)胞)

爪哇根霉 Rhizopus javanicus大鼠小腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基

栗褐鏈霉菌 Streptomyces badius根瘤菌 Rhizobium sp.

Multi-tagged Protein Lysate(E.coli)/多標(biāo)簽蛋白裂解液(E.coli)可視型藍(lán)色預(yù)染中分子量蛋白Marker

酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactisRL95-2, 人子宮內(nèi)膜腺細(xì)胞系

異常漢遜酵母異常變種 Hansenula anomala var. anomala大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

香菇 Lentinula edodes大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基

無(wú)花果曲霉 Aspergillus ficuumCEM/C1(人急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞)