蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱：組織蛋白酶K(CTSK)重組蛋白豬

英文名稱：Recombinant Cathepsin K (CTSK)

CTS-K; CTS02; CTSO; CTSO1; CTSO2; PKND; PYCD; Pycnodysostosis; Cathepsin O; Cathepsin X

型號：GOY-01D157

酶與激酶

感染免疫

骨骼代謝

物種：Sus scrofa; Porcine (Pig，豬)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：Lysosome. Secreted

預(yù)測分子量：57.3kDa

實(shí)際分子量：55kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Lys90~Ala318 (Accession # Q9GLE3) with N-terminal His and GST Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：7.9

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant Peptidyl Arginine Deiminase Type IV (PADI4)  產(chǎn)品名稱：肽基脫亞氨酶Ⅳ(PADI4)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Peptidyl Arginine Deiminase Type VI (PADI6)  產(chǎn)品名稱：肽基脫亞氨酶Ⅵ(PADI6)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Pantothenate Kinase 4 (PANK4)  產(chǎn)品名稱：泛酸激酶4(PANK4)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Phosphoglucomutase 5 (PGM5)  產(chǎn)品名稱：葡萄糖磷酸變位酶5(PGM5)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Peroxiredoxin 4 (PRDX4)  產(chǎn)品名稱：過氧化還原酶4(PRDX4)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Peroxiredoxin 4 (PRDX4)  產(chǎn)品名稱：過氧化還原酶4(PRDX4)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

抗菌肽/天蠶素抗體 Cecropin

肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白CORO1A抗體 Coronin 1a

鈣/鈣調(diào)蛋白依賴蛋白激酶IG抗體 Camk1g

細(xì)胞表面趨化因子受體8抗體 CCR8

趨化素樣因子超家族成員2抗體 CMTM2

胱硫醚γ裂解酶抗體 CTH

囊性纖維化跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)節(jié)因子抗體 CFTR

酪蛋白激酶2相互作用蛋白1抗體 CKIP-1

α-s1酪蛋白抗體 Alpha s1 Casein

CIDEB抗體 CIDEB

CD40L抗體 CD40L

高密度脂蛋白受體/清道夫受體抗體 Scavenging Receptor SR-BI

組織蛋白酶K(CTSK)重組蛋白豬鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus

鹽水球菌 Salinococcus sp.

NCI-H2227(人小細(xì)胞肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

熱帶假絲酵母 Candida tropicalis

蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種 Bacillus thuringiensis subsp. galleriae

費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii猴菌

桿菌屬 Lactobacillus sp.豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

純白鏈霉菌 Streptomyces candidus

小鼠肺細(xì)胞英文名稱：

AsPC-1(人胰腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

小鼠成肌細(xì)胞泡盛曲霉 Aspergillus awamori

毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes根瘤菌 Rhizobium sp.